182 н справка где взять: образец заполнения 2021 и бланк — Бухонлайн

Содержание

Не могу получить с прежнего места работы справку по форме 182н, т.к. работодатель фактически прекратил деятельность. Где мне получить необходимые для исчисления пособий по временной нетрудоспособности сведения? — ГУ

В соответствии с ч.ч. 5, 6 ст. 13 Федерального закона от 29.12.2006 г. № 255-ФЗ «Об обязательном социальном страховании на случай временной нетрудоспособности и в связи с материнством» (далее — Закон № 255-ФЗ) для назначения и выплаты пособий по временной нетрудоспособности, по беременности и родам, ежемесячного пособия по уходу за ребенком застрахованное лицо представляет, в том числе, справку (справки) о сумме заработка, из которого должно быть исчислено пособие, с места (мест) работы (службы, иной деятельности) у другого страхователя (у других страхователей).

Форма и порядок выдачи справки о заработке, из которого должно быть исчислено пособие, утверждены Приказом Минтруда России от 30.04.2013 г. № 182н «Об утверждении формы и порядка выдачи справки о сумме заработной платы, иных выплат и вознаграждений, на которую были начислены страховые взносы на обязательное социальное страхование на случай временной нетрудоспособности и в связи с материнством, за два календарных года, предшествующих году прекращения работы (службы, иной деятельности) или году обращения за справкой, и текущий календарный год» (далее — Приказ № 182н, Справка).

В соответствии с п. 2 Приложения № 2 к Приказу № 182н выдача Справки осуществляется в день прекращения работы (службы, иной деятельности) у страхователя, в течение времени выполнения которой лицо подлежало обязательному социальному страхованию на случай временной нетрудоспособности и в связи с материнством. При невозможности вручить Справку непосредственно в день прекращения работы (службы, иной деятельности) страхователь направляет застрахованному лицу по адресу его места жительства, известному страхователю, уведомление о необходимости явиться за Справкой либо о даче согласия на отправление ее по почте. В случае согласия застрахованного лица на отправление Справки по почте указанное лицо уведомляет об этом страхователя в письменном виде.

Пунктом 3 Приложения № 2 к Приказу № 182н установлено, что после прекращения работы (службы, иной деятельности) Справка выдается по письменному заявлению застрахованного лица (его законного представителя либо доверенного лица) не позднее трех рабочих дней со дня получения (регистрации) страхователем заявления.

Заявление может подаваться застрахованным лицом лично либо через его законного представителя (доверенное лицо) или направляться по почте. При обращении с заявлением доверенного лица представляются документы, удостоверяющие его личность и полномочия (п. 4 Приложения № 2 к Приказу № 182н).

Вместе с тем, ч. 7.2 ст. 13 Закона № 255-ФЗ установлено, что в случае, если застрахованное лицо не имеет возможности представить справку (справки) о сумме заработка, из которого должно быть исчислено пособие, с места (мест) работы (службы, иной деятельности) у другого страхователя (у других страхователей) в связи с прекращением деятельности этим страхователем (этими страхователями) либо по иным причинам, страхователь, назначающий и выплачивающий пособие, либо территориальный орган страховщика, назначающий и выплачивающий пособие по заявлению застрахованного лица направляет запрос в территориальный орган Пенсионного фонда Российской Федерации о представлении сведений о заработной плате, иных выплатах и вознаграждениях застрахованного лица у соответствующего страхователя (соответствующих страхователей) на основании сведений индивидуального (персонифицированного) учета в системе обязательного пенсионного страхования.
Форма указанного заявления застрахованного лица, форма и порядок направления запроса, форма, порядок и сроки представления запрашиваемых сведений территориальным органом Пенсионного фонда Российской Федерации утверждены Приказом Минздравсоцразвития России от 24 января 2011 г. № 21н.

Исходя из вышеизложенного, Вам необходимо обратиться к работодателю, с которым Вы состоите в настоящее время в трудовых отношениях, с заявлением о направлении запроса в территориальный орган Пенсионного фонда Российской Федерации по форме, приведенной в Приложении № 1 к Приказу Минздравсоцразвития России от 24 января 2011 г. № 21н.

 

Как получить справку 182н, если организация ликвидирована. Справка 182н после увольнения.

По общему правилу, справка 182н выдается сотруднику в день прекращения работы. Данная справка необходима для расчета размера пособий по временной нетрудоспособности, по беременности и родам, по уходу за ребенком.

Если работодатель «забыл» выдать справку, то у физического лица после прекращения работы есть возможность получить справку на основании письменного заявления. В данном случае справка 182н выдается в течение трех рабочих дней со дня подачи заявления. Но что делать, если справки 182н на руках нет, а организация ликвидирована (обанкротилась, закрылась и т.п.)? Как подтвердить свои доходы у прошлого работодателя?

В таком случае данные о своих доходах за прошлые года можно получить от ПФР. Для этого физическому лицу необходимо подать заявление нынешнему работодателю о направлении запроса в территориальный орган Пенсионного фонда Российской Федерации о представлении сведений о заработной плате, иных выплатах и вознаграждениях, форма которого утверждена приложением №1 к приказу 21н. Заявление должно быть зарегистрировано работодателем. Если в последние годы лицо работало в нескольких организациях, то на каждую компанию необходимо заполнить отдельное заявление.

На основании поданного заявления работодатель не позднее двух рабочих дней формирует запрос по утвержденной форме (приложением №2) и направляет его в территориальный орган Пенсионного фонда РФ по почте или в виде электронного документа, оформленного с использованием электронной цифровой подписи.

Со дня получения запроса территориальный орган Пенсионного фонда в срок не позднее 10 рабочих дней представляет сведения о заработной плате. Исключением является ситуация, когда организация запрашивает сведения за прошлый год в 1 квартале текущего года. В этом случае сведения представляются работодателю в срок не позднее 1 апреля текущего календарного года.

Но необходимо помнить, что в сведениях о заработной плате, полученных от ПФР, будут указаны только фактически начисленные суммы за 2 года, но не будет информации об исключаемых периодах. Так, если вы находились в отпуске по беременности и родам и/или в отпуске по уходу за ребенком, то эти периоды не отразятся в справке и в графе будет указано, что за такой-то год «сведения отсутствуют».

Страхователям: утверждена новая форма справки о сумме заработной платы.

           Приказом Министерства труда и социальной защиты РФ от 30.04.2013 г. № 182н утверждены новая форма и порядок выдачи Справки о сумме заработной платы, иных выплат и вознаграждений за два календарных года, предшествующих году прекращения работы (службы, иной деятельности) или году обращения за справкой о сумме заработной платы, иных выплат и вознаграждений, и текущий календарный год, на которую были начислены страховые взносы, и о количестве календарных дней, приходящихся в указанном периоде на периоды временной нетрудоспособности, отпуска по беременности и родам, отпуска по уходу за ребенком, период освобождения работника от работы с полным или частичным сохранением заработной платы в соответствии с законодательством Российской Федерации, если на сохраняемую заработную плату за этот период страховые взносы в Фонд социального страхования Российской Федерации не начислялись (далее –

справка).  

          С вступлением в силу 02.07.2013 Приказа № 182 н  не подлежит применению форма Справки о сумме заработной платы, иных выплат и вознаграждений, на которую были начислены страховые взносы на обязательное социальное страхование на случай временной нетрудоспособности и в связи с материнством, за два календарных года, предшествующих году прекращения работы (службы, иной деятельности) или году обращения за справкой, и текущий календарный год, утвержденная

приказом Минздравсоцразвития РФ от 17.01.2011 N 4н.

          В соответствии со ст. 14 Федерального закона от 29.12.2006 г. № 255-ФЗ «Об обязательном социальном страховании на случай временной нетрудоспособности и в связи с материнством» новая форма справки предусматривает заполнение количества календарных дней, приходящихся в расчетном периоде на периоды временной нетрудоспособности, отпуска по беременности и родам, отпуска по уходу за ребенком, период освобождения работника от работы с полным или частичным сохранением заработной платы в соответствии с законодательством РФ, если на сохраняемую заработную плату за этот период страховые взносы в Фонд социального страхования РФ не начислялись.

А также в новой форме справки предусмотрены дополнительные строки, которые заполняются в случае, если в двух календарных годах, предшествующих году прекращения работы или году обращения за справкой, в текущем календарном году либо в одном из указанных годов застрахованное лицо находилось в отпуске по беременности и родам и (или) в отпуске по уходу за ребенком.

Порядок выдачи справки предусматривает, что при невозможности вручить справку непосредственно в день прекращения работы страхователь направляет застрахованному лицу по адресу его места жительства, известному страхователю, уведомление о необходимости явиться за справкой либо о даче согласия на отправление ее по почте. В случае согласия застрахованного лица на отправление справки по почте указанное лицо уведомляет об этом страхователя в письменном виде.

В справке не допускаются подчистки и исправления. Заполненная справка удостоверяется круглой печатью организации.

Подписи  руководителя  и бухгалтера организации не должны закрываться печатью.

 

 

 

Отдел администрирования страховых взносов

28.06.2013

Если справка 182н распечатана на трех листах, ФСС считает ее недействительной

На нашем форуме сегодня развернулась дискуссия по поводу справки 182н, необходимой для расчета больничных. Бухгалтеры спорят, имеет ли значение размер шрифта в данной справке и соответственно то, на скольки листах она распечатана.

Как утверждает одна из читательниц форума, справка должна быть размещена на двух сторонах одного листа бумаги формата А4. Если листов несколько, то сотрудник легко может подменить один из них, где указан размер его зарплаты, чтобы получить из ФСС завышенное пособие. По мнению ФСС, справка, распечатанная на нескольких листах, негодна.

Организация ООО «Ромашка» выдала справку сотруднику 182-н на трех отдельных страницах:
1-я стр. — данные на организацию и о сотруднике
2-я стр. — данные о начисленной заработной плате и часть 4 раздела (данных об количестве дней отсутствия)
3-я стр. — окончание 4 раздела.
Естественно, подпись и печать расположены только на 3-ей странице.

На момент предоставления сотрудником этой справки у нас в офисе сидела выездная проверка из ФСС, ей и был задан вопрос: «Имеем ли мы право принять такую справку и не будет ли у нас в дальнейшем проблем с ФСС-м?» На что получили ответ (цит.)

«Все будет зависеть от желания и настроения проверяющего, нам дана рекомендация в таких ситуациях справку считать недействительной»,
т.к., получается,что человек при желании и наличии доступа к компу/принтеру имеет возможность изменить первые две страницы по своему усмотрению. Например, поставить зп с шестью нулями.

Поскольку у нас нет желания бодаться с ФСС, сотруднику было рекомендовано обратиться на предыдущее место работы:
или — за выдачей новой справки, распечатанной на 1 листе с двух сторон;
или — 1 вариант справки прошить и заверить, как положено заверять документы (прошнуровано, пронумеровано. . и т.п.)

ООО «Ромашка» категорически не желает исправлять справку, мотивируя это так: «… а где написано, что так нельзя?»
В конечном итоге страдает сотрудник, который бегает туда-сюда.
И как быть в данной ситуации?
— Аноним

Участники обсуждения считают такое мнение ФСС абсурдным и рекомендуют бухгалтеру не издеваться над сотрудником, однако отмечают, что некоторый риск имеется всегда и от этого никак не застрахуешься.

Да уж, проблема… Работодатель, принявший справку не обязан проверять ее подлинность, но ответственность на нем, если не обратиться в суд, справку недостоверную может выдать и бывший р/д (в т.ч. и на 1 листе), и работник подменить листы.
—kiry

А в каком виде вы печатаете справки 182н?

Обсуждение происходит в теме форума «182н».

Напомним, сегодня на официальном портале правовой информации опубликован Приказ Минтруда, которым вносятся изменения в вышеназванную справку 182н.

HumanaChoice H5216-182 (PPO) H5216-182 Детали плана и стоимость на 2022 год

HumanaChoice H5216-182 (PPO) покрывает дополнительные льготы и услуги, некоторые из которых могут не покрываться программой Original Medicare (Medicare, часть A и часть B) .

Покрытие Стоимость
Услуги хиропрактики

В сети:
Доплата за услуги хиропрактики, покрываемые Medicare 20 долларов.00
Для услуг хиропрактики требуется предварительное разрешение
Требуется предварительное разрешение

Принадлежности для диабетиков, обучение, нутриционная терапия и мониторинг

В сети:
Доплата за расходные материалы для диабетиков, покрываемые Medicare 0 долларов США. 00
Совместное страхование диабетических принадлежностей, покрываемых Medicare 10% – 20%
Доплата за покрываемые Medicare диабетические терапевтические туфли или вкладыши $10,00
Предварительное разрешение требуется для диабетических принадлежностей и услуг 90 от указанных производителей (см. Сведения о страховом покрытии)
Требуется предварительное разрешение

Медицинское оборудование длительного пользования (DME)

в сети:
Состание:
CONSSUNARY для Medicare, покрытая прочным медицинским оборудованием 20%
Предыдущее разрешение, необходимое для долговечного медицинского оборудования
Предварительная авторизация Требуется

Out-Network:
CONSSSARY для покрытых Medicare Медицинское оборудование длительного пользования 30%

Диагностические тесты, лабораторные и рентгенологические услуги и рентген Внутри сети:

Амбулаторные диагностические процедуры/тесты/лабораторные услуги:
Доплата за покрываемые Medicare диагностические процедуры/тесты $0. 00 до до $ 100.00
Доплата для медицинских услуг, покрытых Medicare $ 0.00 до $ 40.00
$ 40.00
Предыдущее разрешение, необходимые для амбулаторных диапазон Procs / Tests / Lab Services

Authient Diag / Therapeutic Rad :
Доплата за покрываемые Medicare рентгенологические услуги 45,00 долларов США по 380,00 долларов США
Доплата за покрываемые Medicare радиологические услуги 45 долларов США.00
CONSSARUSURAL CONESSURAL для Medicare, покрытых лечебными радиологическими радиологическими службами 20%
Доплата для медицинских работ. Требуется предварительное разрешение. $0.00
Совместное страхование покрываемых Medicare диагностических процедур/тестов 30%
Совместное страхование лабораторных услуг, покрываемых Medicare 30%
Совместное страхование покрываемых Medicare диагностических радиологических услуг 30%
Совместное страхование покрываемых Medicare терапевтических радиологических услуг 30%
Совместное страхование покрываемых Medicare амбулаторных рентгенологических услуг 30%

Медицинское обслуживание на дому

В сети:
Доплата за медицинские услуги на дому, покрываемые Medicare $0. 00
Требуется предварительное разрешение для получения медицинских услуг на дому
Требуется предварительное разрешение

Стационарная психиатрическая помощь В сети:

Услуги психиатрической больницы:
360 долларов.00 в день в течение нескольких дней с 1 по 4
$ 0.00 в день в течение нескольких дней от 5 до 90
Предыдущая авторизация Требуется для психиатрической больницы
Предыдущая авторизация Требуется

Out-Network:
Состание Услуги психиатрической больницы за пребывание 30%

Амбулаторная психиатрическая помощь

Внутри сети:
Доплата за индивидуальные сеансы, покрываемые Medicare 40 долларов. 00
Доплата
Доплата для Medicare Group Sessions $ 40.00
Предыдущая авторизация Требуется для амбулаторных услуг психического здоровья
Предварительная авторизация Требуется

Out-Network:
CONSSSARY для Medicare покрыты индивидуальными сессиями 30 %
Совместное страхование групповых занятий, покрываемых Medicare 30%

Амбулаторные услуги/хирургия Внутри сети:

Амбулаторные больничные услуги:
Доплата за покрываемые Medicare амбулаторные больничные услуги 45 долларов.00 до $ 360,00 $ 360.00 $ 360.00
Предыдущее разрешение Требуется для амбулаторных услуг

Услуги амбулаторных услуг

Услуги по амбулатору:
Доплата для медицинских услуг на медицинских услугах — за пребывание $ 0. 00
Доверимость доверия, необходимые для Услуги амбулаторных услуг

Услуги амбулаторного хирургического центра :
Доплата для амбулаторных услуг хирургического центра $ 310.00
Доверирование разрешения на амбулаторные услуги
Предварительная авторизация Требуется

Out-Network:

амбулаторных больниц и услуг ASC :
Совместное страхование покрываемых Medicare амбулаторных больничных услуг 30%
Совместное страхование покрываемых Medicare услуг амбулаторного хирургического центра 30%

Амбулаторная помощь при злоупотреблении психоактивными веществами

Внутри сети:
Доплата за индивидуальные сеансы, покрываемые Medicare 40 долларов.00 к до $ 100.00
Доплата для медицинских сеансов группы $ 40. 00 до $ 100.00
$ 100.00
Предварительное разрешение Требуется для амбулаторных веществ Услуги насилия
Предварительное разрешение требуется

Сеть:
Совместное страхование индивидуальных или групповых занятий, покрываемых Medicare 30%

Товары, отпускаемые без рецепта В сети:

Товары, отпускаемые без рецепта (OTC):
Доплата за товары, отпускаемые без рецепта (OTC) $0.00
Максимальная льгота по плану 45,00 долларов США каждые три месяца
Заместительная терапия никотином (НЗТ), предлагаемая в качестве льготы безрецептурного отпуска по части C

Вне сети:

Товары без рецепта :
Совместное страхование безрецептурных препаратов, не покрываемых программой Medicare 50%
Максимальное пособие по плану 45,00 долларов США

Подиатрические услуги

В сети:
Доплата за услуги подиатрии, покрываемые Medicare 45 долларов. 00
Для услуг подиатрии требуется предварительное разрешение
Требуется предварительное разрешение

Уход в учреждении квалифицированного сестринского ухода В сети:

Службы квалифицированного медицинского ухода:
$0.00 за день в течение нескольких дней с 1 по 20
$ 188.00 $ 188.00 в день на дни 21 до 100 Предыдущее разрешение Требуется для квалифицированного сестринского обслуживания Услуги
Предварительная авторизация Требуется

OUT-сеть:
Состание на услуги учреждения квалифицированного сестринского ухода за пребывание 30%

Школьная дисциплина | Генеральная ассамблея Колорадо

Законопроект требует, чтобы совет по образованию штата обнародовал правила стандартизации метода отчетности для школьных округов и чартерных школ, чтобы сообщать непропорциональные данные о дисциплине в отдел образования (департамент) и в двухгодичный обзор федерального департамента образования.

Законопроект требует, чтобы каждый школьный округ и институт чартерной школы дезагрегировали отчеты о нарушениях поведения и дисциплины по расе, этнической принадлежности, полу, статусу учащегося с инвалидностью и социально-экономическому статусу в максимально возможной степени в соответствии с федеральным «Семейным образовательным Закон о правах и неприкосновенности частной жизни 1974 г.», 20 USC. сек. 1232г. Законопроект также требует, чтобы каждый школьный округ и чартерная школа института сообщали о конкретных действиях, предпринятых в ответ на каждое нарушение дисциплины.

Законопроект запрещает сотрудникам правоохранительных органов арестовывать студентов или выдавать повестки, штрафы или уведомления с требованием явки студента в суд или полицейский участок за определенные правонарушения и поведение. Законопроект также запрещает сотруднику школьных ресурсов или сотруднику правоохранительных органов, действующим в своем официальном качестве, надевать наручники на ученика начальной школы.

Законопроект требует, чтобы школьные округа и чартерные школы института приняли политику выбора школьных инспекторов по ресурсам, если школьный округ или чартерная школа института решат заключить контракт с одним или несколькими школьными инспекторами по ресурсам.Законопроект требует, чтобы каждый школьный округ или институт, чартерная школа, и нанявший их правоохранительный орган совместно разработали процесс оценки для сотрудников школьных ресурсов. Каждый школьный округ или институт чартерной школы и правоохранительные органы должны заключить меморандум о взаимопонимании для решения таких вопросов, как стратегии, процедуры и практика, которые сводят к минимуму воздействие на учащихся системы уголовного правосудия и правосудия по делам несовершеннолетних; приоритизация стратегий для улучшения обучения, безопасности и благополучия учащихся; и создание устойчивого и успешного баланса между образованием и защитой учащихся, учителей и школы.

Законопроект требует, чтобы каждый совет по образованию школьного округа и каждая чартерная школа института приняли политику сообщения и устранения непропорциональных дисциплинарных мер в государственных школах. Каждый школьный округ и чартерная школа института должны разрабатывать, внедрять и ежегодно пересматривать планы улучшения для устранения несоразмерных дисциплинарных методов по расовому, этническому происхождению, полу, статусу учащегося с инвалидностью и социально-экономическому статусу на основе данных о политике и дисциплинах, сообщаемых в Департамент в соответствии с требованиями к отчетности в безопасных школах.При реализации плана улучшения для устранения несоразмерной дисциплинарной практики каждый школьный округ и чартерная школа института должны предоставить родителям учащихся, зачисленных в школу, письменное уведомление о плане улучшения и проблемах, определенных департаментом как вызывающих необходимость в строить планы. В письменном уведомлении должны быть указаны сроки разработки и принятия плана улучшения, а также даты, время и место проведения общественного собрания и публичных слушаний.

Законопроект требует, чтобы школьные округа и учреждения чартерных школ решали проблему хронических прогулов и несоразмерных дисциплинарных взысканий, чтобы оказывать поддержку учащимся, которым угрожает риск хронических прогулов и дисциплинарных мер, включая удаление из класса, отстранение от занятий и исключение из школы. Законопроект вносит поправки в программу грантов на услуги для исключенных и находящихся в группе риска учащихся, чтобы сосредоточить внимание на услугах для учащихся, которым грозит отсев из школы из-за хронических прогулов и дисциплинарных взысканий.


(Примечание: это краткое изложение относится к этому законопроекту в том виде, в каком он был представлен.)

Мифы и варианты нормального полового развития

West J Med. 2000 март; 172(3): 182–185.

Темы в обзоре

JON M NAKAMOTO

1

1 Департамент педиатрии и эндокринологии Mattel детская больница в UCLA 22-315 MDCC 10833 Le Corte Ave Los Angeles, CA-1752

1 Департамент педиатрии и эндокринологии Детская больница Mattel в Калифорнийском университете в Лос-Анджелесе 22-315 MDCC 10833 Le Conte Ave Los Angeles, CA-1752

Copyright © Copyright 2000 BMJ Publishing GroupЭта статья цитируется в других статьях PMC.

Распространены мифы о половом созревании. Эти заблуждения вызывают ненужное беспокойство, например, у родителей, которые путают изолированное развитие лобковых волос или груди с истинным половым созреванием. Даже медицинские работники не застрахованы: некоторые могут не знать о последних данных, свидетельствующих о том, что у здоровых девочек половое созревание может начаться раньше, чем в учебнике в возрасте 8 лет, а другие могут ошибочно информировать родителей о том, что к их 10-летнему возрасту остается всего несколько дюймов роста. -старшая дочь, у которой начались менструации.В этой статье обсуждаются распространенные мифы, окружающие нормальные вариации полового развития.

Обобщающие пункты

  • Появление лобковых волос не обязательно означает начало истинного полового созревания

  • Изолированное развитие молочных желез у девочек до 6 лет без других изменений, скорее всего, доброкачественное преждевременное телархе

  • Развитие груди является самым ранним признаком истинного полового созревания и может происходить у здоровых белых девочек уже в возрасте 7 лет и даже раньше у афроамериканских девочек.

  • Мальчиков, страдающих задержкой полового созревания, можно лечить низкими дозами тестостерона для ускорения роста и полового развития, не влияя на их окончательный рост

МЕТОДЫ

пубертатное развитие встречалось в моей практике.Представленные доказательства были получены из опубликованных статей и обзоров, найденных в результате поиска в MEDLINE, а также из практических руководств, полученных на недавних специализированных встречах и дискуссионных группах по детской эндокринологии в Интернете.

ДОБРОКАЧЕСТВЕННАЯ ПРЕЖДЕВРЕМЕННАЯ АДРЕНАХЕ

Миф: лобковые волосы сигнализируют о начале полового созревания

Реальность такова, что без увеличения груди или яичек лобковые волосы (пубархе) и запах тела указывают на увеличение секреции надпочечниками слабых андрогенов (адренархе), а не на активацию гипоталамо-гипофизарно-гонадная единица (истинное половое созревание).До 1997 года преждевременное адренархе определяли как появление лобковых волос у девочек младше 8 лет и мальчиков младше 9 лет. Тем не менее, результаты большого поперечного исследования показывают, что развитие лобковых волос может быть нормальным у белых девочек в возрасте 7 лет и у афроамериканских девочек в возрасте 6 лет. 1

Хотя определение нормального полового созревания по сравнению с преждевременным половым созреванием все еще меняется, раннее половое созревание, несомненно, является доброкачественным, если оно соответствует критериям, указанным в рамке.Если эти критерии соблюдены, то для большинства детей диагностическое обследование может быть ограничено продолжительным наблюдением. Некоторые врачи назначают рентгеновский снимок, чтобы убедиться, что скелетный возраст ребенка не превышает хронологический возраст более чем на 2,5 стандартных отклонения (обычно около 2 лет). Ультразвуковое сканирование брюшной полости или анализы крови на дегидроэпиандростерона сульфат, 17-гидроксипрогестерон и тестостерон требуются редко.

Характеристики доброго преждевременного Adrenarche

  • редкий до умеренного развития лобковых волос

  • Rebse или без роста подмышечных волос

  • Mild или No Acne

  • Минимальные или отсутствие ускорения при росте

  • MILLD APORINE Body Odor

  • Нет снижения голоса

  • без увеличения груди или яичка

  • NO CLITROMEGALY

доброкачественная преждевременного Thelarche

миф: развитие молочной железы.

В действительности увеличение молочных желез, возникающее изолированно у девочек младше 6 лет или у младенцев, с большей вероятностью свидетельствует о доброкачественном преждевременном телархе, чем о истинном преждевременном половом созревании.Критерии в рамке могут быть полезны при проведении этого дифференциального диагноза. В случаях, когда подозревается истинное преждевременное половое созревание, чувствительные методы диагностики включают ультразвуковое сканирование органов малого таза (увеличение матки подтверждает повышенный эффект эстрогенов, а двустороннее увеличение яичников убедительно указывает на активацию центральной гипоталамо-гипофизарной оси) и сверхчувствительные иммунохемолюминометрические анализы лютеинизирующий гормон. 2

9058 Характеристики доброкачественной недостаточности Thelarche

  • возраст младше 6 лет

  • повышенные профиль груди

  • минимальный или без роста грудных сопильев (соски) или orolae

  • без роста губ. Minora

  • Минимальные или не придумываясь со слизистой оболочкой вагинальной влагалища, что остается блестящим и красноватым

  • без ускорения в росте

  • No Pubic Hair

Ранний нормальный половой созревание

миф: девочки начинают половое созревание

Реальность такова, что это может быть частично правдой: хотя средний возраст наступления менархе (12.8 лет) не сильно снизился за последние 60 лет, более свежие данные свидетельствуют о том, что нижняя возрастная граница для нормального телархе или начала полового созревания находится ниже порога в 8 лет, который цитируется во многих текстах. 1 , 3 Недавно опубликованные рекомендации предполагают, что обширное обследование не требуется в плановом порядке у здоровых девочек с телархе или половым созреванием, наступающим уже в возрасте 7 лет у белых девочек или 6 лет у афроамериканских девочек. 4 Однако существуют разногласия по поводу того, является ли нормальным телорхе или половое созревание у 6- и 7-летних детей, и большинство детских эндокринологов по-прежнему рекомендуют тщательное обследование и последующее наблюдение за девочками, у которых начинается телорхе и прогрессирование полового созревания в этом возрасте. Что касается мальчиков, отсутствие новых клинических данных и более высокая вероятность заболевания приводят к постоянным рекомендациям о том, что мальчиков младше 9 лет с увеличением полового члена, истончением мошонки и ускоренным ростом следует официально обследовать.

Возможные причины обнаружения более раннего телархе или полового созревания включают предвзятость при установлении диагноза; воздействие на детей экологических эстрогенов из пластика, пищевых продуктов и пестицидов; улучшение социально-экономического положения; или более раннее созревание, вызванное увеличением средней массы тела детей.Эта последняя возможность поднимает интересные вопросы о связи между массой тела и началом полового созревания. Для некоторых видов связь прямая: скотоводы знают, что половая зрелость телки больше зависит от достижения критического веса, чем от определенного возраста. У людей легкое ожирение связано с небольшим увеличением скелетного возраста и более ранним началом полового созревания. 5 Теории о действии гормона лептина и его роли в регуляции массы тела, полового созревания и фертильности быстро развиваются и имеют последствия для таких состояний, как преждевременное или отсроченное половое созревание, нервная анорексия, ожирение и ановуляция. 6

Миф: менархе означает, что конец роста близок

Реальность такова, что средняя прибавка в росте после менархе составляет около 7 см (3 дюйма), и она еще больше у девочек, у которых менструация наступает раньше. нормального. Последующие данные продольного исследования Фелса показывают, что девочки, у которых менструация начинается в возрасте 10 лет, вырастают в среднем на 10 см (4 дюйма), в то время как девочки, у которых менархе задерживается до 15 лет, вырастают в среднем на 5 см (2 дюйма). ). 7 Дополнительную уверенность обеспечивают данные, предполагающие, что более раннее телорхе связано с увеличением интервала до менархе: например, у 8- или 9-летней девочки, у которой только что начала формироваться грудь, среднее время до менархе будет ближе к 3 годам, чем к 2. 8 Сочетание более длительного времени до наступления менархе и большего увеличения роста после начала менструации может объяснить, почему девочки, у которых половое созревание начинается примерно в 6–8 лет, не становятся низкими во взрослом возрасте. И наоборот, меньший прирост роста после менархе и более короткий интервал между телархе и менархе у девочек с задержкой полового созревания может объяснить, почему фармакологическая задержка полового созревания (с использованием депо-агонистов гонадотропин-рилизинг-гормона) оказывает непостоянное и ограниченное влияние на увеличение их конечного роста. 9

КОНСТИТУЦИОННАЯ ЗАДЕРЖКА РОСТА И ПОЛОВОГО РАЗВИТИЯ

Миф: опускание до нижнего центиля на диаграмме роста всегда означает патологическое состояние быть здоровым, но иметь конституциональную задержку роста и полового созревания. Эти поздно расцветающие обычно переходят на более низкий центиль роста где-то в возрасте до 3 лет, а затем остаются на том же центиле роста на протяжении большей части своего детства.

Примерно в возрасте от 12 до 14 лет для мальчиков (от 10 до 12 лет для девочек), что является типичным периодом беспокойства, они снова переходят вниз к более низкому центилю роста (1) из-за задержки начала их пубертатного всплеска роста относительно своим сверстникам.

Типичный рост (нанесенный на стандартную диаграмму роста) мальчика с конституциональной задержкой роста и полового созревания. Обратите внимание на снижение центильного роста, начиная примерно с 12-летнего возраста

К сожалению, часто не существует определенного метода, позволяющего отличить здоровых подростков с поздним цветением от более редких подростков с истинным заболеванием.Обязателен сбор анамнеза и физикальное обследование с акцентом на обнаружение дисморфизма или заболеваний центральной нервной системы и желудочно-кишечного тракта. Тщательная интерпретация рентгеновского снимка костного возраста, смягченная пониманием его ограничений, позволяет оценить окончательный рост взрослого подростка и сравнить его с рассчитанным средним целевым ростом родителей. Для опытного врача с надлежащими инструментами (например, орхиометром Прадера для измерения размера яичек) точная оценка пубертатного развития дает столько же информации, сколько рентгенограмма костного возраста: типичный подросток мужского пола без задержки скелетного возраста имеет начало увеличения яичек (объем > 3 мл или > 2,0 мл).5 см [> 1 дюйм] в длину) в возрасте 11,5 лет, увеличиваясь до 12 мл (что соответствует максимальной скорости роста) к 14 годам. 10 Начало развития молочных желез у девочки предполагает скелетный возраст 10 или 11 лет.

Лабораторные исследования, полезные для медленно растущих подростков

  • Концентрация свободного тироксина

  • Концентрация инсулиноподобного фактора роста-1 (соматомедин С)

  • 3 Концентрация инсулиноподобного фактора роста 4 500093

  • Полное значение крови

  • эритроцитов. Дело в том, что врачи могут использовать разные подходы: одни сразу отправляют подростка на лабораторные исследования, а другие предпочитают наблюдать за скоростью роста (скоррелированной с возрастом скелета, а не с хронологическим возрастом), прежде чем приступать к более обширной оценке. Некоторые лабораторные исследования, полезные для оценки этих подростков, показаны в рамке.

    Миф: лечение тестостероном мальчиков с задержкой конституционального развития снижает окончательный рост взрослого человека

    В действительности мальчикам с задержкой конституционального развития и возрастом скелета старше 10 лет назначают низкие дозы тестостерона (обычно 50 мг ежемесячно внутримышечно в течение 3–12 месяцев) ускоряет рост (часто удваивая скорость роста) и развитие вторичных половых признаков без уменьшения их окончательного взрослого роста. 11 Всплеск роста может начаться на год раньше, чем без лечения. Низкие дозы пероральных анаболических стероидов (до 2,5 мг/день), таких как оксандролон или флуоксиместерон, также увеличивают рост, не оказывая отрицательного влияния на конечный рост, но используются реже из-за их потенциальной гепатотоксичности и менее удовлетворительного воздействия на вторичные половые признаки. 12 , 13 При этих низких дозах увеличение яичек должно продолжаться, что свидетельствует о простой конституциональной задержке у мальчика, а не о более стойком дефиците гипоталамо-гипофизарной функции (гипогонадотропный гипогонадизм). 14

    В более высоких дозах (особенно в тех, которые используются спортсменами не по прямому назначению) андрогены уменьшают рост взрослых, способствуя созреванию эпифизарных пластин роста быстрее, чем линейный рост. Крайне важно прояснить разницу между тщательно контролируемым лечением низкими дозами тестостерона при конституциональной задержке и злоупотреблением анаболическими стероидами, используемыми для получения несправедливого спортивного преимущества.

    ВЫВОДЫ

    Подростки и дети младшего возраста с доброкачественными вариантами нормального полового развития, такими как преждевременный адренархе или телархе, раннее нормальное половое созревание и конституциональная задержка, часто встречаются в педиатрической практике.Признание того, что такие варианты являются нормальными, является важным навыком. Опровергая наиболее распространенные мифы об этих вариантах и ​​других аспектах нормального полового созревания, медицинские работники могут значительно уменьшить беспокойство родителей и детей и избежать ненужных направлений.

    ​

    Примечания

    Финансирование: Нет

    Конкурирующие интересы: Не заявлено

    Ссылки

    1. Herman-Giddens ME, Slora EJ, Wasserman RC, et al. Вторичные половые признаки и менструации у молодых девушек, наблюдаемые в офисной практике: исследование сети педиатрических исследований в офисных настройках.Педиатрия 1997; 99: 505-512. [PubMed] [Google Scholar]2. Нили Э.К., Уилсон Д.М., Ли П.А. и др. Спонтанная концентрация гонадотропина в сыворотке крови при оценке преждевременного полового созревания. Дж. Педиатр 1995; 127: 47-52. [PubMed] [Google Scholar]3. Вышак Г., Фриш Р.Э. Доказательства вековой тенденции в возрасте менархе. N Engl J Med 1982; 306: 1033-1035. [PubMed] [Google Scholar]4. Капловиц П.Б., Оберфилд С.Е. Пересмотр возрастных ограничений для определения преждевременного полового созревания у девочек в Соединенных Штатах: последствия для оценки и лечения.Препараты и терапия и Исполнительный комитет Детского эндокринного общества Лоусона Уилкинса. Педиатрия 1999; 104: 936-941. [PubMed] [Google Scholar]5. Сэнгер П., Сандберг Д.Э. Задержка полового созревания: когда будить горниста. Дж. Педиатр 1998; 133: 724-726. [PubMed] [Google Scholar]6. Магоффин Д.А., Хуанг CTF. Лептин и репродукция. Эндокринолог 1998;8:79-86. [Google Академия]7. Роше АФ. Завершающая фаза роста в росте. Рост Genet Horm 1989; 5: 4-6. [Google Академия]8. Марти-Хеннеберг К., Визманос Б.Продолжительность полового созревания у девочек связана со сроками его наступления. Дж. Педиатр 1997; 131: 618-621. [PubMed] [Google Scholar]9. Карел Дж. К., Хей Ф., Кутан Р. и др. Лечение агонистами гонадотропин-рилизинг-гормона девочек с конституциональной низкорослостью и нормальным половым развитием. J Clin Endocrinol Metab 1996; 81: 3318-3322. [PubMed] [Google Scholar] 10. Таннер Дж. М., Дэвис PSW. Клинические продольные стандарты роста и скорости роста для североамериканских детей. Дж. Педиатр 1985; 107: 317-329.[PubMed] [Google Scholar] 11. Ричман Р.А., Кирш Л.Р. Терапия тестостероном у мальчиков-подростков с конституциональной задержкой роста и развития. N Engl J Med 1988; 319: 1563-1567. [PubMed] [Google Scholar] 12. Tse WY, Buyukgebiz A, Hindmarsh PC, et al. Долгосрочные результаты лечения оксандролоном у мальчиков с конституциональной задержкой роста и полового созревания. Дж. Педиатр 1990; 117: 588-591. [PubMed] [Google Scholar] 13. Стрикленд А.Л. Отдаленные результаты лечения низкими дозами флуоксиместерона при конституциональной задержке роста и полового созревания и генетической низкорослости.Педиатрия 1993; 91: 716-720. [PubMed] [Google Scholar] 14. Капловиц П. Задержка полового созревания у мальчиков с ожирением: сравнение с конституциональной задержкой полового созревания и реакция на терапию тестостероном. Дж. Педиатр 1998; 133: 745-749. [PubMed] [Google Scholar]

    Интегрированный анализ показывает, что вместе miR-182, miR-200c и miR-221 могут помочь в диагностике рака простаты

    Abstract

    Исследования показали, что микроРНК являются многообещающими биомаркерами, которые можно использовать для более точной диагностики рака. В этом исследовании мы разработали интегрированный многоэтапный процесс отбора для анализа доступных наборов данных с высокой пропускной способностью для получения информации о микроРНК как биомаркерах рака. Применяя этот подход к профилям экспрессии микроРНК рака предстательной железы и наборам данных на портале данных атласа генома рака, мы идентифицировали миРНК-182, миРНК-200c и миРНК-221 в качестве возможных биомаркеров рака простаты. Были изучены ассоциации экспрессии этих трех микроРНК с клиническими параметрами, а также их диагностические возможности.Для прогнозирования генов-мишеней этих трех микроРНК использовали несколько онлайн-баз данных, и результаты были подтверждены значительными статистическими корреляциями. Сравнивая с другими 18 типами рака, перечисленными на портале данных «Атлас генома рака», мы обнаружили, что комбинация миРНК-182 и миРНК-200c с повышенной регуляцией и подавляющей регуляцией миРНК-221 происходит только при раке предстательной железы. Это обеспечивает уникальную биологическую характеристику рака предстательной железы, которую потенциально можно использовать для диагностики на основе тестирования тканей. Кроме того, наше исследование также показало, что эти три микроРНК связаны с патологическим статусом рака предстательной железы.

    Образец цитирования: Gu Y, Lei D, Qin X, Chen P, Zou Ym, Hu Y (2015) Комплексный анализ показывает, что миР-182, миР-200c и миР-221 могут помочь в диагностике рака простаты. ПЛОС ОДИН 10(10): e0140862. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862

    Редактор: Rajvir Dahiya, Медицинский центр UCSF / VA, США

    Получено: 22 июля 2015 г.; Принято: 1 октября 2015 г.; Опубликовано: 20 октября 2015 г.

    Авторские права: © 2015 Gu et al.Эта статья находится в открытом доступе и распространяется в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах документ и его вспомогательные информационные файлы.

    Финансирование: Первые четыре и последний авторы были частично поддержаны грантами Национального фонда естественных наук Китая (№ 81272853 и № 81472414) и Фонда естественных наук Гуанси (№ 2012GXNSFAA053152).Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Рак предстательной железы (РПЖ) является вторым наиболее часто диагностируемым раком и шестой по значимости причиной смерти от рака среди мужчин во всем мире [1]. Это клинически гетерогенно-многоочаговое заболевание, число случаев которого неуклонно растет [2].До сих пор обнаружение простатспецифического антигена (ПСА) обеспечивало наиболее эффективный биомаркер для диагностики и ответа на лечение при РПЖ. Однако чувствительность и специфичность теста на ПСА недостаточны, что приводит к низкой частоте выявления [3]. С продвижением исследований канцерогенеза исследования РПЖ все больше сосредотачиваются на новых стратегиях раннего выявления и профилактики [4].

    Исследования показали, что микроРНК (миРНК), тип эндогенной малой некодирующей РНК с приблизительной длиной 22 нуклеотида [5], может быть связана с раком; в частности, аберрантные микроРНК связаны с клиническим поведением и могут быть многообещающими биомаркерами для более точной диагностики/прогноза рака [6,7,8].В литературе сообщалось об использовании микроРНК в качестве потенциальных диагностических маркеров при РПЖ. Сообщалось, что миР-141 повышен в сыворотке больных РПЖ и значительно коррелирует с уровнем ПСА [9]. Более того, было показано, что панель из пяти миРНК (снижение активности let-7e, let-7c и миР-30c, активация миР-622 и миР-1285) способна точно дифференцировать РПЖ от доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ). и нормальные образцы [10]. Эти отчеты предполагают, что выявление аберраций в микроРНК, связанных с определенным типом рака, должно обеспечить хорошие биомаркеры для этих конкретных видов рака и способствовать более ранней диагностике.

    Сегодня высокопроизводительные технологии позволили получить большое количество данных о раке, поэтому желательно использовать эти данные для идентификации микроРНК и аберраций, связанных с различными типами рака. Однако анализ этих высокопроизводительных данных сталкивается с трудностями. Одной из трудностей является отсутствие однородности среди различных наборов данных miRNA из-за того, что для их получения использовались разные платформы. Различные наборы данных miRNA, которые экспрессируются по-разному, имеют тенденцию показывать несоответствия друг другу.Среди методов, разработанных для решения этой проблемы, было показано, что метод надежной ранговой агрегации (RRA), который определяет ранговый вектор для каждого гена только на основе наборов данных, в которых он присутствует, обеспечивает статистически значимые мета-сигнатуры микроРНК [11, 12]. Метод основан на использовании статистики порядка для сравнения каждого гена с исходным случаем, когда все списки предпочтений перемешиваются случайным образом, а затем присваиваются уровни значимости для результатов [11]. Однако для того, чтобы точно идентифицировать потенциально полезные микроРНК в качестве биомаркеров из выбранных микроРНК с использованием RRA, в дополнение к методу RRA необходимы дальнейший статистический анализ и проверка.

    В этом исследовании мы применили новый многоэтапный подход к отбору существующих высокопроизводительных данных о РПЖ с целью идентификации микроРНК в качестве биомаркеров РПЖ. Сначала мы применили метод RRA для выбора потенциальных биомаркеров миРНК в опухолях предстательной железы, используя 11 опубликованных профилей экспрессии миРНК. Затем мы использовали Атлас данных генома рака (TCGA) для дальнейшей проверки выбранных микроРНК несколькими способами с помощью теста суммы рангов Уилкоксона. Мы обнаружили, что комбинация двух микроРНК с повышенной экспрессией (миРНК-182, микроРНК-200c) и одной микроРНК со сниженной экспрессией (миРНК-221) уникальна для РПЖ.Это говорит о том, что эта комбинация микроРНК и уровней их экспрессии потенциально может обеспечить дополнительные эффективные диагностические индикаторы РПЖ.

    Материалы и методы

    Поиск литературы

    Информация об исследованиях профиля экспрессии миРНК при РПЖ систематически искалась в базах данных PubMed, Embase и Highwire с использованием строки поиска (простата и (рак* ИЛИ опухоль* ИЛИ опухоль*) и (микроРНК* ИЛИ микроРНК * ИЛИ микро-*) ). Кроме того, мы получили профили экспрессии miRNA для РПЖ путем поиска в Gene Expression Omnibus (GEO) (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/) [13] и репозитории ArrayExpress (http://www.ebi.ac.uk/arrayexpress/) [14]. Поиск был ограничен данными, опубликованными в период с 1 января 2005 г. по 31 января 2014 г. Нашими критериями отбора были: (а) оригинальные экспериментальные статьи, в которых сравнивались ткани опухоли предстательной железы и неопухолевые ткани, (б) исследования экспрессии микроРНК , (c) исследуемый организм был Homo sapiens , и (d) вирусные микроРНК и зонды, не относящиеся к микроРНК, были исключены.

    В этом исследовании неопухолевые ткани включали ткани предстательной железы, прилегающие к опухоли, и ткани независимых здоровых доноров, но не ДГПЖ. Данные, извлеченные из каждого исследования, включали: первого автора, оценку Глисона, регион, тип анализа, количество зондов микроРНК и количество образцов. Списки микроРНК со статистически значимой экспрессией были либо извлечены из публикаций, либо получены непосредственно от авторов.

    Доступ и обработка данных TCGA

    Данные, включающие нормализованные значения экспрессии miRNA-HiSeq, число необработанных прочтений mRNA-seq и клиническую информацию о РПЖ, были загружены пакетом «TCGA-Assembler» в R [15].Данные, нормализованные по генам HiSeq уровня 3 для РПЖ, были получены из FIREHOSE Broad GDAC (http://gdac.broadinstitute.org/). Число прочтений на килобазу модели экзона на миллион картированных (RPKM) нормированных значений для экспрессии мРНК и число прочтений на миллион картированных miRNA (RPM) нормированных значений для экспрессии miRNA дополнительно преобразовывали в log 2 . Складчатые изменения экспрессии миРНК между опухолями и нормальными тканями рассчитывали с использованием медианно-центрированных значений RPM. Основываясь на необработанных количествах прочтений, дифференциальный анализ экспрессии мРНК был выполнен с помощью пакета DESeq Bioconductor в R [16], который использует модель отрицательного биномиального распределения и локальную регрессию для оценки взаимосвязи между средним значением и дисперсией каждого гена.Все дифференциально экспрессируемые гены считались значимыми, если абсолютные значения их log 2 кратных изменений превышали 1, а частота ложных открытий (FDR) была <0,1.

    Прогнозирование генов-мишеней микроРНК и анализ обогащения

    Предсказания генов-мишеней дифференциально экспрессируемых микроРНК были выполнены с использованием TargetScan [17], miRwalk [18] и базы данных PICTAR [19]. Прогнозируемые цели должны быть выбраны как минимум двумя алгоритмами.В нашем процессе отбора также использовались проверенные мишени из базы данных CLIP-Seq starBase [20]. Выбранные гены-мишени были перекрывающимися мишенями предсказанных мишеней и проверенных генов-мишеней. Гены-мишени в следующих обсуждениях демонстрируют значительную корреляцию с экспрессией микроРНК. Инструмент DAVID [21] был использован для выяснения молекулярных функций miRNAs-кандидатов.

    Статистический анализ

    Используемый нами метод RRA был взят из предыдущего исследования [12].Мы интегрировали 11 списков микроРНК, чтобы убедиться, что списки ранжируются последовательно лучше, чем ожидалось пакетом RobustRankAggreg в R [11] с использованием функции «aggregateRanks». Извлеченные списки микроРНК были сначала расставлены по приоритетам на основе статистического теста p значений (менее 0,05 считалось значимым). Если значение p не сообщалось, вместо этого мы использовали кратное изменение (FC). После анализа RRA была проведена перекрестная проверка с исключением одного (LOOCV) для оценки стабильности полученных p значений.Мы обнаружили, что значения p стабилизировались после 10 000 запусков этого анализа. Таким образом, мы использовали 10 000 тестов в качестве отсечки, исключили один случайный список микроРНК для каждого теста и использовали среднее значение p каждой микроРНК в качестве конечного значения p .

    Затем с помощью функции «cor.test» в R оценивали коэффициенты ранговой корреляции Спирмена и двусторонние p -значения микроРНК. Взаимосвязь между клиническими признаками и экспрессией микроРНК оценивали по рангу Уилкоксона. сумма или непараметрический критерий Крускала-Уоллиса с использованием «уилкокса.test» или «kruskal.test» в R соответственно. Диагностические возможности миРНК оценивали с помощью пакета «pROC» в R. Все статистические расчеты проводили на log 2 трансформированных уровней экспрессии.

    Результаты

    Отбор кандидатов в мета-сигнатурные микроРНК РПЖ

    Наши критерии отбора (см. Материалы и методы) привели к выбору 11 наборов данных профилирования микроРНК для нашего анализа (рис. 1). Шесть исследований также предоставили шкалу Глисона или ткани карциномы, поэтому мы классифицировали их как группу карциномы.Краткий обзор 11 выбранных наборов данных представлен в таблице 1. Всего мы проанализировали 347 образцов карциномы и 188 нормальных образцов. Эти наборы данных включали различные платформы микрочипов, а количество зондов микроРНК варьировалось от 88 до 847. Результаты RRA предоставили восемь статистически значимых микроРНК, состоящих из четырех маркеров с повышенной экспрессией и четырех маркеров с пониженной экспрессией. После проверки стабильности значения p miR-375 ( p = 0,053 > 0,050) и miR-25-3p ( p = 0.074 > 0,050) были исключены, а остальные шесть мета-сигнатурных микроРНК ( p <0,050) были сохранены для дальнейшего анализа. Эти шесть выбранных миРНК включали две миРНК с повышенной экспрессией (миР-182-5p, миР-200c-3p) и четыре микроРНК с пониженной регуляцией (миР-145-5p, миР-205-5p, миР-221-3p и миР -222-3с).

    Проверка мета-сигнатурных микроРНК с использованием базы данных TCGA

    База данных

    TCGA использовалась для проверки изменений уровня экспрессии шести выбранных мета-сигнатурных микроРНК у пациентов с РПЖ.При проверке скорректированное значение отсечки p было установлено на 0,05, а отсечение FC было установлено на 2, чтобы обеспечить более строгие индикаторы идентификации для дифференциации микроРНК. На основании анализа 498 образцов РПЖ и 52 нормальных образцов мы обнаружили, что три статистически значимые микроРНК согласуются с результатом анализа профиля экспрессии с помощью RRA (таблица 2 и рис. 2). В частности, миР-182 (FDR = 3,50E-26, FC = 5,89) и miR-200c (FDR = 1,10E-26, FC = 3.50) были значительно повышены, миР-221 (FDR = 1,43E-16, FC = 0,41) была значительно снижена, а FC миР-145, миР-205 и миР-222 превышали 0,5 (FDR = 3,29E-01, 6,50E-06 и 1,33E-12 соответственно, FC = 0,90, 0,52 и 0,52 соответственно). Чтобы дополнительно подтвердить наш выбор этих трех микроРНК в качестве потенциальных биомаркеров РПЖ, мы затем исследовали уровни их экспрессии в 18 других типах опухолей по данным TCGA. Результаты анализа этих трех микроРНК в 18 других типах опухолей и РПЖ показаны в таблице S1 и на рис. 3 соответственно.Эти результаты показали, что повышение экспрессии миР-182 и миР-200c и понижение экспрессии миР-221 можно наблюдать только при РПЖ.

    Рис. 2. Данные TCGA для трех дифференциально экспрессируемых микроРНК в первичной солидной опухоли предстательной железы (n = 498) и нормальной солидной ткани (n = 52).

    (A) Уровни экспрессии миР-182 в первичной солидной опухоли предстательной железы и нормальной солидной ткани. (B) Уровни экспрессии миР-200c в первичной солидной опухоли предстательной железы и нормальной солидной ткани. (C) Уровни экспрессии миР-145 в первичной солидной опухоли предстательной железы и нормальной солидной ткани.Значения уровня экспрессии были рассчитаны с использованием преобразованных значений RPM log 2 .

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862.g002

    Рис. 3. Значения log 2 FC трех микроРНК при 19 типах рака.

    Изменение кратности представляет собой отношение медианных сигналов между раковой тканью и нормальной тканью. Сокращения: FC, смена фолда; PRAD, аденокарцинома простаты; BLCA, уротелиальная карцинома мочевого пузыря; ХОЛ, холангиокарцинома; COAD, аденокарцинома толстой кишки; ESCA, рак пищевода; HNSC, плоскоклеточный рак головы и шеи; KICH, Хромофоб почек; KIRC, почечная светлоклеточная карцинома; KIRP, папиллярно-клеточная карцинома почки; LIHC, гепатоцеллюлярная карцинома печени; LUAD, аденокарцинома легкого; LUSC, плоскоклеточный рак легкого; PCPG, феохромоцитома и параганглиома; READ, ректальная аденокарцинома; STAD, аденокарцинома желудка; THCA, карцинома щитовидной железы; THYM, тимома; PAAD, аденокарцинома поджелудочной железы; и SKCM, Кожная меланома кожи. * Указанная миРНК дифференциально экспрессируется при раке.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862.g003

    Затем мы использовали ранговую корреляцию Спирмена, чтобы проверить связь между тремя идентифицированными микроРНК при РПЖ. Мы обнаружили, что miR-182 и miR-200c показали положительную корреляцию ( r s = 0,633, p < 2,200E-16), и они были отрицательно коррелированы со сниженной экспрессией miR-221 (miR -182 против миР-221: r с = -0.479, р < 2.200E-16; миР-200 против миР-221: r с = -0,335, p = 1,983E-14). Поэтому мы провели дальнейший анализ, чтобы подтвердить эти три микроРНК и их уникальную комбинацию уровней экспрессии при РПЖ.

    Чтобы исследовать уровни экспрессии miR-182, miR-200c и miR-221 в крови или сыворотке РПЖ, мы использовали GEO2R [33] для анализа данных, мы обнаружили, что miR-182 (log 2 FC = 1,740, p = 0,046) и miR-200c (log 2 FC = 1. 963, p = 0,009) показали сверхэкспрессию, а miR-221 (log 2 FC = -0,810, p = 0,110) не показала достоверной разницы в серии GSE24201 [34], включавшей 14 образцов крови больных РПЖ. и 15 образцов здоровых братьев из 11 семей. Мы также сравнили сыворотки мышей 3 TRansgenic Adenocarcinoma of Mouse Prostate (TRAMP) с их 3 однопометниками дикого типа из GSE29314 [35] и обнаружили, что miR-182 (log 2 FC = 1,187, p = 0.010) и miR-200c (log 2 FC = 1,389, p = 0,002) также повышались и достигали p < 0,05, в то время как miR-221 (log 2 FC = -0,047, p = 0,818) не показали другой тенденции.

    Корреляция экспрессии трех выбранных микроРНК с клинико-патологическими параметрами

    Клинико-патологические особенности пациентов с РПЖ, полученные из TCGA, показаны в таблице S2. Их средний возраст составлял 60,4 ± 7,0 лет, а уровень ПСА до операции составлял 0.7–87 (мкг/л). Наш ранговый анализ Спирмена показал, что эти три микроРНК были в значительной степени связаны с предоперационными уровнями ПСА и возрастом. Как miR-182, так и miR-200c показали положительную корреляцию с двумя клиническими параметрами, тогда как miR-221 показала отрицательную корреляцию. Эти три микроРНК не показали существенных различий между расами (таблица 3). Мы обнаружили, что миР-221 показала значительную дифференциацию с точки зрения степени Глисона (низкий балл Глисона против высокого балла Глисона), позитивность лимфатических узлов, патологию стадии N (pN0 противpN1) и патологии Т-стадии (pT2, pT3, pT4) ( p < 0,05 для всех сравнений) (см. опухоли и положительные лимфатические узлы. Однако мы не обнаружили существенных различий между этими клиническими признаками и миР-182 или миР-200c.

    Диагностическое значение выбранных микроРНК

    Мы провели анализ рабочих характеристик ответа (ROC), чтобы оценить использование трех выбранных микроРНК в качестве потенциальных биомаркеров для дифференциации тканей РПЖ от нормальных тканей (рис. 4), и обнаружили, что MiR-200c (AUC = 0.963, 95% доверительный интервал, ДИ = 0,9463–0,980, p < 0,0001) показал более высокую диагностическую способность, чем miR-182 (AUC = 0,957, 95% доверительный интервал, ДИ = 0,9248–0,9896, p < 0,0001) и miR-221 (AUC = 0,857, доверительный интервал 95%, CI = 0,8022–0,9127, p <0,0001). Когда подход логистической регрессии использовался для комбинации этих трех микроРНК, кривая ROC показала гораздо лучшую диагностическую точность, чем если бы они использовались по отдельности, результаты показали AUC, равную 0.972 (95% доверительный интервал, ДИ = 0,9519–0,992, p <0,0001). При анализе оптимальное пороговое значение устанавливалось при максимальной сумме чувствительности и специфичности. Было обнаружено, что диагностическая чувствительность и специфичность комбинации этих трех микроРНК составляют 94,2% и 92,6% соответственно.

    Рис. 4. Площади под кривыми ROC для трех идентифицированных микроРНК и их комбинации, которые отличают образцы РПЖ от нормальных образцов.

    (A) Кривая ROC для миР-182.(B) Кривая ROC для miR-200c. (C) Кривая ROC для миР-221. (D) Кривая ROC для комбинации трех микроРНК.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862.g004

    Целевые гены и распознавание биологического пути

    Во-первых, мы идентифицировали 800 повышающих и 1698 отрицательно регулируемых различных генов на основе модели, использующей отрицательное биномиальное распределение для 374 образцов рака предстательной железы и 52 нормальных контролей из TCGA (таблица S3). Во-вторых, мы предсказали гены-мишени для этих трех миРНК, а затем выбрали перекрывающиеся гены в качестве участников пути (129 генов для миР-182, 95 генов для миР-200c и 55 генов для миР-221) (таблица S4).В-третьих, мы провели корреляционный анализ между этими тремя микроРНК и экспрессией мРНК всех перекрывающихся генов. Результаты показали, что miR-182 и miR-200c были положительно связаны почти со всеми перекрывающимися мРНК с повышающей регуляцией и отрицательно связаны почти со всеми мРНК с пониженной регуляцией. Однако корреляция между миР-221 и перекрывающимися генами показала обратную зависимость (рис. 5). Неожиданным наблюдением из нашего анализа было то, что регуляция экзоцитоза синаптической мембраны 3 ( RIMS3 ) постоянно сверхпредставлена ​​всеми тремя miRNAs.

    Рис. 5. Кластеры генов-мишеней микроРНК по их коэффициентам корреляции.

    Представление тепловой карты паттернов корреляции для мишеней микроРНК. 267 дифференциально экспрессируемых мРНК-мишеней, включая 63 мишени с повышенной экспрессией и 204 мишени с пониженной регуляцией, использовали для кластеризации микроРНК. Строки тепловой карты представляют мРНК-мишени, а столбцы представляют микроРНК. Красные квадраты указывают на отрицательную корреляцию, фиолетовые квадраты указывают на положительную корреляцию, а белые пятна (бесцветные) указывают на отсутствие корреляции.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862.g005

    Чтобы понять общие биологические функции этих трех миРНК, мы провели анализ путей белка через эволюционные отношения (PANTHER) в DAVID через гены-мишени. Результаты показали, что эти три микроРНК не имеют одних и тех же путей, но они часто связаны с клеточными сигнальными путями (Fig. 6).

    Рис. 6. Общие гены-мишени и биологические пути трех микроРНК.

    Фиолетовый овал обозначает RIMS3 ; три синих овала представляют три микроРНК; черные прямые линии указывают на целевое воздействие микроРНК на ген; пунктирные линии указывают на участие микроРНК в путях PANTHER, а их цвета отражают значимость -log 10 преобразованных значений p для путей.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0140862.g006

    Обсуждение

    В последние годы многие исследования были посвящены открытию биомаркеров миРНК и их биологических функций (или молекулярного механизма) при РПЖ.В этом исследовании мы применили интегрированный многоэтапный подход к отбору для анализа наборов данных о раке из GEO и TCGA и идентифицировали три микроРНК и их уникальный паттерн комбинации экспрессии, которые проявлялись только в наборах данных РПЖ.

    Представление о том, что miRNAs вовлечены в рак, подтверждается доказательствами того, что miRNAs локализованы в основном в областях генома, связанных с раком, или в ломких участках [36, 37]. Для РПЖ мы можем получить следующую информацию из литературы. Известно, что miR-200c находится в позиции 12p13.31, и сообщалось [38], что числа копий участка хромосомы 12p13.31-p12.3 удалены при РПЖ. Также сообщалось [39], что область хромосомы 7q32.2, в которой находится miR-182, имеет высокую частоту гетерозиготности и/или изменений дисбаланса микросателлитов при канцерогенезе простаты. Метилирование гистонов приводит к молчанию всего кластера miR-221/miR-222, что выяснено анализом сигнатуры метилирования в клеточных линиях РПЖ [40]. Следовательно, только на основании опубликованной информации об этих местоположениях мы можем сформировать гипотезу о том, что миР-182, миР-200с и миР-221/миР-222 тесно связаны с РПЖ.

    Также сообщалось, что miRNA-182 сверхэкспрессируется при РПЖ и играет активную роль в пролиферации и инвазии в vitro и vivo [41, 42]. Сообщалось, что уровень миР-182 в тканях РПЖ и четырех клеточных линиях (LNCap, PC-3, DU145 и 22Rv1) выше, чем в тканях ДГПЖ и нормальных клетках эпителия предстательной железы (RWPE-1) [41]. Связанная с прогрессированием РПЖ сверхэкспрессия miR-182 подавляет экспрессию гена-супрессора опухоли FOXF2 , что снижает инвазию и миграцию клеток РПЖ [42].В клетках предстательной железы miR-182 индуцирует признаки перехода от мезенхимы к эпителию и независимый от фактора роста рост путем репрессии SNAI2 , который, как было показано, является репрессором пролиферации в клетках РПЖ [43, 44]. Наше исследование предсказания целевого гена правильно идентифицировало FOXF2 и SNAI2 . Семейство miRNA-200, состоящее из пяти членов (miR-200a, miR-200b, miR-200c, miR-429 и miR-141), рассматривается как супрессор опухоли, поскольку оно ингибирует эпителиально-мезенхимальный переход, опухоль клеточная инвазия и метастазирование [45].Кластер miR-200c~141 подавляет пролиферацию клеток метастатического рака предстательной железы человека путем ингибирования JAGGED1 , что может быть важно для метастазов [46]. Сообщалось [47], что миР-221 подавлялась при агрессивном РПЖ и ассоциировалась с оценкой по шкале Глисона и, таким образом, указывала на стадию опухоли. Понижающая регуляция miR-221 также была обнаружена в образцах секрета простаты [48]. Кроме того, считается, что miR-221 участвуют в развитии или стабильности фенотипа кастрационно-резистентного рака предстательной железы (CRPC), поскольку в клетках CRPC наблюдается избыточная экспрессия [49].Кроме того, многие повторные проверки показали, что miR-221 в клетках РПЖ обладает способностью регулировать экспрессию p27/kip1 и ингибировать несколько циклинзависимых киназных комплексов [50, 51]. Все это согласуется с нашим анализом, который показал, что три идентифицированные микроРНК были вовлечены в развитие РПЖ.

    Увеличение возраста коррелирует с риском РПЖ [52, 53], поскольку уровни микроРНК меняются с возрастом [54], а диагностика и лечение РПЖ определяются уровнем ПСА [55].Наши результаты показали, что возраст и ПСА положительно коррелируют с экспрессией миРНК (миР-182 и миР-200c), но отрицательно связаны с экспрессией микроРНК (миР-221). Комбинация мультибиомолекул была предложена в качестве эффективных индикаторов для диагностики во многих исследованиях [56, 57]. Наши результаты показали, что AUC комбинации этих трех выбранных микроРНК была очень высокой для тканей РПЖ.

    Поскольку опухолевые клетки могут выделять микроРНК в кровоток [58], желательно использовать микроРНК в жидкостях организма для диагностических целей, если это возможно.Сообщалось, что уровни микроРНК в ткани РПЖ сильно коррелируют с уровнями в сыворотке до простатэктомии [54]. Однако, несмотря на то, что сочетание увеличения экспрессии миР-182 и миР-200c и снижения экспрессии миР-221 является уникальным (со статистической значимостью) в крови РПЖ, потребуются дальнейшие исследования, чтобы дифференцировать эти маркеры крови при РПЖ от маркеров при РПЖ. LUSC (плоскоклеточный рак легких) или BLCA (уротелиальная карцинома мочевого пузыря) (см. рис. 3 и таблицу S1).

    Благодаря нашему анализу генов-мишеней и корреляций мы обнаружили, что подавленная регуляция RIMS3 присутствовала одновременно с тремя идентифицированными микроРНК. Ранее об этом не сообщалось для РПЖ. Также ранее сообщалось о некоторых путях, связанных с РПЖ, в которых участвуют три идентифицированные микроРНК. Например: (1) сообщалось, что вместе с TMPRSS2-ERG PI3-киназный путь активирует онкогенез простаты [59]; (2) передача сигналов Wnt и ее ключевой компонент β-катенин способствуют онкогенезу предстательной железы [60]; и (3) сигнальный путь hedgehog участвует в развитии РПЖ и в прогрессировании более агрессивных и даже резистентных к терапии болезненных состояний [61].Все эти исследования предоставляют дополнительные подтверждающие доказательства наших выводов.

    Заключение

    Насколько нам известно, это исследование является первым, в котором идентифицированы и проанализированы комбинации нескольких микроРНК в качестве потенциального биомаркера РПЖ на основе анализа микрочипов микроРНК и наборов данных TCGA. Наше исследование показывает, что метод интегрированного анализа, основанный на RRA и сопровождаемый другими статистическими анализами и проверками, может эффективно идентифицировать комбинации нескольких микроРНК в качестве потенциальных биомаркеров рака. Наши результаты показывают, что три выбранные микроРНК и их уникальный комбинированный паттерн экспрессии при РПЖ могут иметь клиническое значение в дополнение к существующим методам тестирования. Наконец, хотя мы применили предложенный подход многоэтапного отбора только для изучения высокопроизводительных наборов данных с целью выявления потенциальных биомаркеров РПЖ, мы считаем, что этот подход также может быть применен для исследования других типов рака с использованием аналогичных высокопроизводительных наборов данных.

    Благодарности

    Основная часть этой работы была выполнена во время визита первого и последнего авторов в Университет Висконсин-Милуоки.Они хотели бы поблагодарить Университет Висконсин-Милуоки и его преподавателей за гостеприимство, оказанное им во время их визита.

    Вклад авторов

    Инициатива и разработка экспериментов: ЮМГ ЮЛГ ЮМЗ. Проведены эксперименты: XQ YMG. Проанализированы данные: PYC YMG. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты анализа: DQL. Написал статью: YMG.

    Каталожные номера

    1. 1. Джемал А., Брей Ф., Центр М.М., Ферлей Дж., Уорд Э., Форман Д. Глобальная статистика рака.CA Cancer J Clin 2011; 61(2): 69–90. пмид:21296855
    2. 2. He HC, Zhu JG, Chen XB, Chen SM, Han ZD, Dai QS и др. МикроРНК-23b подавляет пероксиредоксин III при раке предстательной железы человека. Письмо ФЭБС, 2012; 586 (16): 2451–2458. пмид:22710126
    3. 3. Сита-Лумсден А., Дарт Д.А., Ваксман Дж., Беван К.Л. Циркулирующие микроРНК как потенциальные новые биомаркеры рака предстательной железы. Бр Дж Рак 2013; 108 (10): 1925–30. пмид:23632485
    4. 4. Фань Си, Чен Си, Ву Д.Связь между общим генетическим вариантом микроРНК-499 и предрасположенностью к раку: метаанализ. Мол Биол Реп 2013; 40(4): 3389–94. пмид:23271127
    5. 5. Zamore PD, Haley B. Ribo-gnome: большой мир малых РНК. Наука 2005; 309 (5740): 1519–24. пмид:16141061
    6. 6. Мартенс-Узунова Э. С., Ялава С.Е., Дитс Н.Ф., ван Леендерс Г.Дж., Мёллер С., Трапман Дж. и соавт. Диагностические и прогностические признаки транскриптома малой некодирующей РНК при раке предстательной железы.Онкоген 2012; 31(8): 978–91. пмид:21765474
    7. 7. Карлссон Дж., Хелениус Г., Карлссон М.Г., Андрен О., Клинга-Леван К., Олссон Б. Различия в экспрессии микроРНК при развитии опухоли в переходной и периферической зонах предстательной железы. BMC Рак 2013; 13: 362. pmid:238

    8. 8. Вальтер Б.А., Валера В.А., Пинто П.А., Мерино М.Дж. Комплексное профилирование микроРНК рака предстательной железы. Джей Рак 2013; 4(5): 350–7.pmid:23781281
    9. 9. Митчелл П.С., Паркин Р.К., Крох Э.М., Фриц Б.Р., Вайман С.К., Погосова-Агаджанян Э.Л. и соавт.Циркулирующие микроРНК как стабильные маркеры на основе крови для обнаружения рака. Proc Natl Acad Sci U S A 2008; 105 (30): 10513–8. пмид:18663219
    10. 10. Chen ZH, Zhang GL, Li HR, Luo JD, Li ZX, Chen GM и др. Панель из пяти циркулирующих микроРНК в качестве потенциальных биомаркеров рака предстательной железы. Простата 2012; 72 (13): 1443–1452. пмид:22298030
    11. 11. Колде Р., Лаур С., Адлер П., Вило Дж. Надежная ранговая агрегация для интеграции списков генов и метаанализа. Биоинформатика 2012; 28(4): 573–80.пмид:22247279
    12. 12. Võsa U, Vooder T, Kolde R, Vilo J, Metspalu A, Annilo T. Метаанализ экспрессии микроРНК при раке легкого. Международный Рак 2013; 132 (12): 2884–2893. пмид:23225545
    13. 13. Барретт Т., Троуп Д.Б., Уилхайт С.Е., Леду П., Руднев Д., Евангелиста С. и др. NCBI GEO: архив высокопроизводительных функциональных геномных данных. Nucleic Acids Res 2009; 37 (выпуск базы данных): D885–90. пмид:18940857
    14. 14. Паркинсон Х., Капушески М., Колесников Н., Рустич Г., Шоджаталаб М., Абейгунавардена Н. и соавт.Обновления ArrayExpress — от архива экспериментов по функциональной геномике до атласа экспрессии генов. Nucleic Acids Res 2009; 37 (выпуск базы данных): D868–72. пмид:125
    15. 15. Zhu Y, Qiu P, Ji Y. TCGA-ассемблер: программное обеспечение с открытым исходным кодом для извлечения и обработки данных TCGA. Национальные методы 2014; 11(6): 599–600. пмид:24874569
    16. 16. Андерс С., Хубер В. Дифференциальный анализ экспрессии для данных подсчета последовательностей. Андерс и Хубер Биология генома 2010; 11(10): Р106.пмид:20979621
    17. 17. Льюис Б.П., Ши И.Х., Джонс-Роудс М.В., Бартель Д.П., Бердж С.Б. Прогнозирование мишеней микроРНК млекопитающих. Сотовый 2003; 115(7): 787. pmid:14697198
    18. 18. Dweep H, Sticht C, Pandey P, Gretz N. База данных miRWalk: предсказание возможных сайтов связывания микроРНК путем «прогулки» по генам трех геномов. Дж. Биомед Информ 2011; 44(5): 839–47. пмид:21605702
    19. 19. Крек А., Грюн Д., Пой М.Н., Вольф Р., Розенберг Л., Эпштейн Э.Дж. и соавт. Комбинаторные прогнозы мишеней микроРНК. Нат Жене, 2005 г.; 37(5): 495–500. пмид:15806104
    20. 20. Ян Дж. Х., Ли Дж. Х., Шао П., Чжоу Х., Чен Ю. К., Цюй Л. Х. starBase: база данных для изучения карт взаимодействия микроРНК-мРНК из данных Argonaute CLIP-Seq и Degradome-Seq; 39 (проблема с базой данных): D202–9. пмид:21037263
    21. 21. Деннис Г. мл., Шерман Б.Т., Хосак Д.А., Ян Дж., Гао В., Лейн Х.К. и др. ДЭВИД: База данных для аннотаций, визуализации и интегрированного обнаружения. Геном Биол 2003; 4(5): П3. пмид:12734009
    22. 22.Амбс С., Прюитт Р.Л., Йи М., Хадсон Р.С., Хоу Т.М., Петрокка Ф. и другие. Геномное профилирование микроРНК и матричной РНК выявляет нарушение регуляции экспрессии микроРНК при раке предстательной железы, регулирующем передачу сигналов и микроРНК. Рак Res 2008; 68(15): 6162–70.pmid:18676839
    23. 23. Lin PC, Chiu YL, Banerjee S, Park K, Mosquera JM, Giannopoulou E, et al. Эпигенетическая репрессия миР-31 нарушает гомеостаз андрогеновых рецепторов и способствует прогрессированию рака предстательной железы. Рак Res 2013; 73 (3): 1232–1244.пмид:23233736
    24. 24. Вах С., Нольте Э., Щирба Дж., Штер Р., Хартманн А., Орнтофт Т. и др. Профили микроРНК карциномы предстательной железы, обнаруженные с помощью мультиплатформенного скрининга микроРНК. Международный Рак J 2012; 130(3): 611–21. пмид:21400514
    25. 25. Шефер А., Юнг М., Молленкопф Х.Дж., Вагнер И., Стефан С., Дженцмик Ф. и др. Диагностические и прогностические последствия профилирования микроРНК при карциноме предстательной железы. Международный Рак 2010; 126(5): 1166–1176. пмид:19676045
    26. 26.Мартенс-Узунова Э.С., Ялава С.Е., Дитс Н.Ф., ван Леендерс Г.Дж., Мёллер С., Трапман Дж. и соавт. Диагностические и прогностические признаки транскриптома малой некодирующей РНК при раке предстательной железы. Онкоген 2012; 31(8): 978–91. пмид:21765474
    27. 27. Карлссон Дж., Дэвидссон С., Хелениус Г., Карлссон М., Любовац З., Андрен О. и др. Сигнатура экспрессии микроРНК, которая разделяет нормальные и злокачественные ткани предстательной железы. Раковая клетка, 2011 г.; 11(1): 14. pmid:21619623
    28. 28.Карлссон Дж., Хелениус Г., Карлссон М.Г., Андрен О., Клинга-Леван К., Олссон Б. Различия в экспрессии микроРНК при развитии опухоли в переходной и периферической зонах предстательной железы. BMC Рак 2013; 13:362. пмид:238

    29. 29. Волиния С., Калин Г.А., Лю К.Г., Амбс С., Чиммино А., Петрокка Ф. и др. Сигнатура экспрессии микроРНК солидных опухолей человека определяет мишени раковых генов. Proc Natl Acad Sci U S A 2006; 103(7): 2257–61. пмид:16461460
    30. 30.Тонг А.В., Фулгам П., Джей С., Чен П., Халил И., Лю С. и др. Анализ профиля микроРНК рака предстательной железы человека. Раковый ген Ther 2009; 16(3): 206–16. пмид:18949015
    31. 31. Озен М., Крейтон С.Дж., Оздемир М., Иттманн М. Широко распространенное нарушение регуляции экспрессии микроРНК при раке предстательной железы человека. Онкоген 2008; 27 (12): 1788–1793. пмид:178

    32. 32. Вальтер Б.А., Валера В. А., Пинто П.А., Мерино М.Дж. Всестороннее профилирование микроРНК рака предстательной железы. Джей Рак 2013; 4: 350–7.пмид:23781281
    33. 33. Барретт Т., Уилхайт С.Е., Леду П., Евангелиста С., Ким И.Ф., Томашевский М. и др. NCBI GEO: архив наборов данных функциональной геномики — обновление. Nucl Acids Res 2013; 41 (выпуск базы данных): D991–D995. пмид:23193258
    34. 34. Маттила Х., Шиндлер М., Исотало Дж., Иконен Т., Вихинен М., Оя Х. и др. Профилирование экспрессии NMD и микроРНК локуса HPCX1 выявило MAGEC1 как ген-кандидат, предрасполагающий к раку предстательной железы. BMC Cancer 2011 2 августа; 11:327.пмид:21810217
    35. 35. Selth LA, Townley S, Gillis JL, Ochnik AM, Murti K, Macfarlane RJ, et al. Открытие циркулирующих микроРНК, связанных с раком предстательной железы человека, с использованием мышиной модели заболевания. Int J Cancer 2012, 1 августа; 131 (3): 652–61. пмид:22052531
    36. 36. Эскела-Кершер А., Слэк Ф. Дж. Онкомиры-микроРНК играют роль в развитии рака. Nat Rev Рак 2006; 6(4): 259–69. пмид:16557279
    37. 37. Калин Г.А., Севиньяни С., Думитру К.Д., Хислоп Т., Ноч Э., Йендамури С. и др.Гены микроРНК человека часто расположены в хрупких участках и областях генома, вовлеченных в рак. Proc Natl Acad Sci U S A 2004; 101(9): 2999–3004. пмид:14973191
    38. 38. Тейлор Б.С., Шульц Н., Иеронимус Х., Гопалан А., Сяо Ю., Карвер Б.С. и соавт. Интегративное геномное профилирование рака простаты человека. Раковая клетка 2010; 18(1): 11–22. пмид:20579941
    39. 39. Брысь М., Мигдальска-Сенк М., Пастушак-Левандоска Д., Форма Е, Чарнецка К., Доманьска Д. и др. Диагностическое значение изменения ДНК: потеря гетерозиготности или аллельного дисбаланса, перспективные для молекулярного стадирования рака предстательной железы.Мед Онкол 2013; 30(1): 391. pmid:23288724
    40. 40. Ke XS, Qu Y, Rostad K, Li WC, Lin B, Halvorsen OJ, et al. Полногеномное профилирование триметилирования лизина 4 гистона h4 и лизина 27 выявляет эпигенетическую сигнатуру канцерогенеза предстательной железы. ПЛоС Один 2009; 4(3): e4687. пмид:19262738
    41. 41. Liu R, Li J, Teng Z, Zhang Z, Xu Y. Сверхэкспрессированная микроРНК-182 способствует пролиферации и инвазии в клетки рака предстательной железы PC-3 путем подавления N-myc нижестоящего регулируемого гена 1 (NDRG1).ПЛоС Один 2013; 8(7): e68982. пмид:23874837
    42. 42. Хирата Х., Уэно К., Шахриари В., Дэн Г., Танака Ю., Табатабай З.Л. и др. МикроРНК-182-5p способствует инвазии и пролиферации клеток путем подавления генов FOXF2, RECK и MTSS1 при раке предстательной железы человека. ПЛоС Один 2013; 8(1): e5550. пмид:23383207
    43. 43. Qu Y, Li WC, Hellem MR, Rostad K, Popa M, McCormack E, et al. МиР-182 и миР-203 индуцируют переход от мезенхимы к эпителию и самодостаточность сигналов роста посредством репрессии SNAI2 в клетках предстательной железы.Международный Рак 2013; 133(3): 544–55. пмид:23354685
    44. 44. Лю Дж., Уйгур Б., Чжан З., Шао Л., Ромеро Д., Вари С. и др. Slug ингибирует пролиферацию клеток рака предстательной железы человека посредством подавления экспрессии циклина D1. Простата 2010; 70 (16): 1768–1777. пмид:20564361
    45. 45. Feng X, Wang Z, Fillmore R, Xi Y. MiR-200, новая звездообразная миРНК при раке человека. Письма Рака 2014; 344(2): 166–173. пмид:24262661
    46. 46. Вальехо Д.М., Капаррос Э., Домингес М.Нацеливание на передачу сигналов Notch с помощью консервативного семейства микроРНК miR-8/200 в развивающихся и раковых клетках. ЕМВО J 2011; 30(4): 756–69. пмид:21224847
    47. 47. Спан М., Кнейц С., Шольц С.Дж., Стенгер Н., Рюдигер Т., Штребель П. и др. Экспрессия микроРНК-221 постепенно снижается при агрессивном раке предстательной железы и метастазах, что является предиктором клинического рецидива. Международный Рак 2010; 127(2): 394–403. пмид:19585579
    48. 48. Гузель Э., Каратас О.Ф., Семерциоз А., Экичи С., Айкан С., Ентур С. и др.Идентификация микроРНК, дифференциально экспрессирующихся в секрете предстательной железы больных раком предстательной железы. Международный Рак J 2015; 136(4): 875–879. пмид: 24976077
    49. 49. Sun T, Wang Q, Balk S, Brown M, Lee GS, Kantoff P. Роль микроРНК-221 и микроРНК-222 в андроген-независимых клеточных линиях рака предстательной железы. Рак Res 2009; 69(8): 3356–3363. пмид:19351832
    50. 50. Galardi S, Mercatelli N, Giorda E, Massalini S, Frajese GV, Ciafrè SA, et al. Экспрессия миР-221 и миР-222 влияет на потенциал пролиферации клеточных линий карциномы простаты человека путем нацеливания на p27Kip1.Дж. Биол. Химия, 2007 г.; 282 (32): 23716–24. пмид:17569667
    51. 51. Чу И.М., Хенгст Л., Слингерланд Дж.М. Ингибитор Cdk p27 при раке человека: прогностический потенциал и значение для противоопухолевой терапии. Nat Rev Рак 2008; 8(4): 253–67. пмид:18354415
    52. 52. Джемал А., Сигел Р., Сюй Дж., Уорд Э. Статистика рака, 2010 г. CA Cancer J Clin 2010; 60(5): 277–300.pmid:20610543
    53. 53. Поледняк АП. Тенденции заболеваемости раком простаты в Коннектикуте (1988–1994 гг. ) По возрасту и расе.Рак 1997; 79(1): 99–103. пмид:8988732
    54. 54. Mahn R, Heukamp LC, Rogenhofer S, von Ruecker A, Muller SC, Ellinger J. Циркулирующие микроРНК (миРНК) в сыворотке пациентов с раком простаты. Урология 2011; 77(5): e9–e16. пмид:21539977
    55. 55. Пренснер Дж. Р., Рубин М. А., Вэй Дж. Т., Чиннайян А. М. Помимо ПСА: новое поколение биомаркеров рака предстательной железы. Sci Transl Med 2012; 4(127): 127rv3.pmid:22461644
    56. 56. Devaux Y, Vausort M, Goretti E, Nazarov PV, Azuaje F, Gilson G, et al.Использование циркулирующих микроРНК для диагностики острого инфаркта миокарда. Клин Хим 2012; 58(3): 559–67. пмид:22252325
    57. 57. Шефер А., Юнг М., Молленкопф Х.Дж., Вагнер И., Стефан С., Дженцмик Ф. и др. Диагностические и прогностические последствия профилирования микроРНК при карциноме предстательной железы. Международный Рак 2010; 126(5): 1166–1176. пмид:19676045
    58. 58. Taylor DD, Gercel-Taylor C. Сигнатуры микроРНК экзосом опухолевого происхождения как диагностические биомаркеры рака яичников.Гинекол Онкол 2008; 110(1): 13–21. пмид:18589210
    59. 59. King JC, Xu J, Wongvipat J, Hieronymus H, Carver BS, Leung DH, et al. Кооперативность TMPRSS2-ERG с активацией пути PI3-киназы в онкогенезе простаты. Нат Жене, 2009 г.; 41(5): 524–526. пмид:19396167
    60. 60. Веррас М., Сан З. Роли и регуляция передачи сигналов Wnt и бета-катенина при раке предстательной железы. Письма Рака 2006; 237(1): 22–32. пмид:16023783
    61. 61. Гонниссен А., Изеберт С., Хаустерманс К.Hedgehog signaling in prostate cancer and its therapeutic implication. Int J Mol Sci 2013; 14(7):13979–4007. pmid:23880852

    Episode 182 | One Piece Wiki

    Finally Clashing! Pirate Luffy vs God Enel!!

    Episode 182

    Kanji

    遂に激突!海賊ルフィVS 神 （ ゴッド ） ・エネル!!

    Romaji

    Tsui ni Gekitotsu! Kaizoku Rufi tai Goddo Eneru!!

    Airdate

    February 22, 2004

    4KidsFunimation

    Title

    They Finally Clash! Pirate Luffy vs. God Eneru!

    Airdate

    November 19, 2008

    Crunchyroll

    Screenplay

    武上純希 — Junki Takegami

    Art

    佐藤美幸 — Miyuki Sato
    川崎美千代 — Michiyo Kawasaki

    Animation

    井手武生 — Takeo Ide

    Direction

    宇田鋼之介 — Kōnosuke Uda

    » Finally Clashing! Pirate Luffy vs God Enel!! » is the 182nd episode of the One Piece anime.

    Краткий обзор

    Наконец, Луффи встречается с Энелем. Во время битвы Энель понимает, что не может навредить Луффи, потому что тот сделан из резины. Тем временем Конис рассказывает другим скайпийцам об опасностях пребывания на острове Ангелов.

    Общий обзор

    Конис едет на вейвере к Острову Ангелов. На Лавли-стрит МакКинли объявляет публике, что Конис, Пагая и Ган Фолл, их бывший бог, находятся в бегах и что любая информация, связанная с их поимкой, должна сообщаться ему и Белым беретам. Горожане обеспокоены тем, что если трое прячутся поблизости, то Божий суд может обрушиться и на горожан. В этот момент солдат сообщает МакКинли, что Конис появился в гавани. Пока Конис колеблется, Белые береты стреляют в нее стрелами. МакКинли задается вопросом, почему Конис ведет себя так, будто хочет быть схваченной, и приказывает ее схватить. Пока белые береты готовятся остановить ее продвижение, Конис продолжает приближаться к ним на полной скорости, прося их убраться с ее дороги.Ей удается наехать на МакКинли, и когда она выпрыгивает из вейвера, вейвер врезается в МакКинли о здание. Конис оказывается в окружении встревоженных горожан, которые боятся, что на нее обрушится Божий суд и что они попадут в него.

    В Арке Максим, Энель смеется и упоминает Нами, что Конис устроила сцену на Острове Ангелов, на что Нами отвечает, что она должна была быть на Гоинг Мерри. Нами спрашивает Энеля о его способностях к мантре, особенно о его способности узнавать людей.Энель объясняет, что он может использовать свои способности молнии, чтобы читать радиоволны в Скайпии, и если он слышит разговор, который ему не нравится, он выносит свой приговор. Нами снова начинает волноваться и задается вопросом, как ей сбежать. Энель смотрит в ее сторону, и она спрашивает его, что-то не так. Энель смотрит в сторону и задается вопросом, чье присутствие он ощущает, а затем упоминает Нами, что это было пустяком.

    Вернувшись на Остров Ангелов, Конис умоляет толпу выслушать ее, на что горожане отвечают, чтобы держаться от них подальше.Солдат пытается напасть на нее, но Конис направляет на него свою огненную базуку, угрожая выстрелить. Затем она велит толпе идти к краю облаков в Облачном Пределе, чтобы они могли сбежать на лодках к Синему морю, так как остров будет уничтожен Энелем. Толпа по-прежнему настроена скептически, и ребенок бросает ей в лицо помидор. Конис роняет свою огненную базуку, и МакКинли задается вопросом, что она собирается делать. Шокируя толпу, она кричит, что не принимает Энеля как Бога. Толпа убегает и прячется, чтобы не получить Божий суд.

    В конце концов, толпа замечает, что с ней ничего не случилось, и она отвечает, говоря, что Богу нет смысла судить ее, когда весь остров будет уничтожен. Она говорит им, что это сообщение от солдата, который рисковал своей жизнью, чтобы сообщить Пагая и ей эту информацию, прежде чем суд был брошен на ее отца и солдата. Толпа по-прежнему обеспокоена, поскольку тот же ребенок спрашивает, почему Бог, который им помогает, сделал это. Конис снова умоляет их отправиться в Облачный край, но граждане выражают беспокойство по поводу того, что они покидают свою родину и переезжают в неизвестное Синее море.Она говорит им, что это лучше, чем быть убитым, и что последние шесть лет они все должны знать, что за человек Энель. Толпа остается неуверенной, полагая, что события, которых она боится, могут не произойти или что их спасет чудо.

    В шоке от упрямства толпы, Конис стреляет из своей огненной базуки в облака. Она напоминает им, что у Энеля есть сила держать их в отчаянии, что время уходит, и что ожидание чуда не спасет их. Она заключает им, что лежать на дне в качестве жертв больше небезопасно и что они должны принять меры сейчас, чтобы покинуть остров, поскольку они больше не могут защищать свою жизнь, обвиняя кого-то позже. Толпа взволнована этим, и многие из них идут собирать вещи и направляются в Облачный край. Некоторые члены толпы остаются, спрашивая о статусе членов их семей, которые являются частью Божественного Отряда, на что она отвечает, что не знает. Они спрашивают, что делает Божественный отряд в первую очередь, и МакКинли прерывает их, говоря, что Белые береты разберутся в этом, и говорит толпе идти вперед, и что Божественный отряд их догонит.

    Толпа убеждена и уходит, и МакКинли говорит Конису, что он не может позволить этому острову превратиться в Бирку, юго-восточный небесный остров, на котором вырос Энель, который исчез шесть лет назад, подразумевая, что Энель разрушил свой родной остров, прежде чем прийти в Скайпию. .МакКинли рассказывает, что до прибытия Энеля МакКинли служил в Божественном Отряде Гана Фолла. МакКинли сформировал Белых Беретов, зная, что, хотя это может показаться предательством Божественного Отряда, он сможет защитить остров, укрепив власть Энеля. Белые береты дали острову годы стабильности, позаботившись о том, чтобы никто не прогневал Бога, но теперь МакКинли признает, что все это было напрасно, если остров действительно уничтожен сейчас. Конис говорит МакКинли, что безопасность людей была для него приоритетом, и в этом нет ничего постыдного.Конис просит его продолжать защищать людей, чтобы помочь Пиратам Соломенной Шляпы сбежать.

    Луффи и Айса верхом на Пьере бегут к Арке Максим. Робин просыпается и понимает, что не может нести Зоро, Вайпера, Чоппера, Гана Фолла и себя по стеблю, чтобы сбежать сразу, но им все равно нужно бежать наверх. Энель понимает, что присутствие, которое он чувствует, не является одним из пяти выживших, и задается вопросом, откуда прячется это новое присутствие. Энель прыгает к краю Арки Максима, чтобы увидеть и услышать крики Луффи.Нами подбегает и видит решительного Луффи, готового дать отпор. Пока Энель и Луффи обмениваются словами, Айса и Пьер прячутся и наблюдают за их демонстрацией, и она беспокоится за безопасность Луффи. Когда Нами пытается предупредить Луффи о способностях Энеля, Энель пристально смотрит на нее, что останавливает ее от разговора. Энель комментирует, что он слышит беготню Острова Ангелов и что они, должно быть, поняли, что с ними произойдет. Луффи спрашивает его, что делает его Богом, и Энель отвечает, что скоро узнает. Луффи подбегает и протягивает руку, чтобы забраться на платформу, на что Энель комментирует, что Луффи тоже не обычный человек, а всего лишь пользователь Парамеции.

    Когда Энель атакует Эль Тора, Луффи бросается к нему, но Эль Тор уволен. Нами и Айса кричат ​​на дисплей. Когда дым рассеивается, в стенах видна гигантская дыра, и Луффи вопросительно смотрит на нее, прежде чем снова взглянуть на Энеля. К удивлению Нами и уверению Энеля, Луффи увернулся от атаки. Энель заряжает Джамбул на 60 миллионов вольт и стреляет из него в Луффи, но на этот раз его ловит. Дым снова рассеивается, показывая невредимого Луффи. Энель выпрыгивает из своего пространства, чтобы на этот раз оказаться прямо перед Луффи, и использует 100 миллионов вольт Ваари.Затем Нами понимает, что обмен репликами Энеля бесполезен, так как электрические атаки не влияют на резиновые свойства тела Луффи. Луффи кричит, что с него достаточно, и после того, как последняя атака Энеля не удалась, открываются потрясенные лица Нами, Айсы, Пьера и, наконец, Энеля. Энель качает головой, думая, что физические атаки не причинят вреда его телу, но когда Луффи бежит к нему, он успешно пинает Энеля и наносит ему урон. Теперь Нами понимает, что молниеносные эффекты Энеля тоже не могут защитить его, и что Луффи может быть единственным естественным врагом Энеля.

    символов в порядке появления

    Заметки об аниме

    • Это первый эпизод, в котором в качестве финала используется слово «Цуки — Тайё».
    • В манге один из скайпийских детей бросает камень в голову Конис и ранит ее; эта сцена смягчена в аниме-версии, так как в нее попадает только помидор.
    • Барабаны Энеля исчезают после удара Луффи.

    Навигация по сайту

    Важность игры в содействии здоровому развитию ребенка и поддержании прочных связей между родителями и детьми | Педиатрия

    Игра позволяет детям использовать свои творческие способности, развивая воображение, ловкость, физическую, когнитивную и эмоциональную силу. Игра важна для здорового развития мозга. 4–6  Именно через игру дети в самом раннем возрасте вовлекаются и взаимодействуют с окружающим миром. Игра позволяет детям создавать и исследовать мир, который они могут освоить, побеждая свои страхи, отрабатывая взрослые роли, иногда вместе с другими детьми или взрослыми опекунами. 7–14  По мере того, как они осваивают свой мир, игра помогает детям развивать новые компетенции, которые приводят к повышению уверенности и устойчивости, которые им понадобятся для решения будущих проблем. 7,10,15  Ненаправленная игра позволяет детям научиться работать в группах, делиться информацией, вести переговоры, разрешать конфликты и приобретать навыки самозащиты. 7,10,11,16  Когда детям разрешается играть в игры, они отрабатывают навыки принятия решений, двигаются в своем собственном темпе, открывают для себя области своих интересов и, в конечном счете, полностью погружаются в увлечения, которыми они хотят заниматься. 7,10,11  В идеале в игре участвуют взрослые, но когда игра контролируется взрослыми, дети соглашаются со взрослыми правилами и опасениями и теряют некоторые преимущества, которые игра предлагает им, особенно в развитии творчества, лидерства и групповых навыков. . 17  В отличие от пассивных развлечений игра развивает активное и здоровое тело. На самом деле было высказано предположение, что поощрение неструктурированных игр может быть исключительным способом повышения уровня физической активности у детей, что является одной из важных стратегий в борьбе с эпидемией ожирения. 18,19  Возможно, прежде всего игра — это простая радость, любимая часть детства.

    Траектория развития детей в решающей степени опосредована надлежащими эмоциональными отношениями с любящими и последовательными опекунами, поскольку они относятся к детям через игру. 4  Когда родители наблюдают за своими детьми в игре или присоединяются к ним в детской игре, им предоставляется уникальная возможность увидеть мир с точки зрения своего ребенка, поскольку ребенок ориентируется в мире, идеально созданном для удовлетворения его или ее потребностей. . (Слово «родитель» используется в этом отчете для обозначения широкого круга взрослых лиц, ухаживающих за детьми, которые воспитывают детей.) Взаимодействия, происходящие в процессе игры, говорят детям, что родители полностью уделяют им внимание, и помогают строить прочные отношения. 6,13,14,20,21  Родители, у которых есть возможность заглянуть в мир своих детей, учатся более эффективному общению со своими детьми, и им предоставляется еще одна возможность предложить мягкое, заботливое руководство. Меньше словесные дети могут выражать свои взгляды, переживания и даже разочарования через игру, что дает их родителям возможность получить более полное представление об их точке зрения. Проще говоря, игра предлагает родителям прекрасную возможность полностью пообщаться со своими детьми.

    Игра является неотъемлемой частью академической среды. Это гарантирует, что школьная обстановка уделяет внимание социальному и эмоциональному развитию детей, а также их когнитивному развитию. Было показано, что он помогает детям приспособиться к школьной обстановке и даже повышает их готовность к обучению, поведение в процессе обучения и навыки решения проблем. 22–32  Социально-эмоциональное обучение лучше всего сочетается с академическим обучением; настораживает, если некоторые из сил, повышающих способность детей к обучению, усиливаются за счет других.Игра и незапланированное время, которые позволяют общаться со сверстниками, являются важными компонентами социально-эмоционального обучения. 33,34 

    Остановить безумие собраний

    Коротко
    Вызов

    Совещания должны повышать креативность и производительность, но они делают противоположное, если они чрезмерны, плохо спланированы, плохо организованы или сочетают в себе все вместе. Эти проблемы сказываются на всей организации и требуют системных исправлений.

    Решение

    Группы должны сначала выяснить, какое время их собрания обычно тратят впустую — групповое, индивидуальное или и то, и другое. Затем они могут выполнить пятиэтапный процесс изменений: (1) собрать впечатления от каждого участника; (2) интерпретировать их вместе; (3) выбрать групповую цель для улучшения собраний, которая кажется лично значимой и мотивирующей; (4) измерять прогресс; и (5) регулярно проверять, чтобы люди не возвращались к старым шаблонам.

    Высмеивание собраний — это суть карикатур Дилберта — мы все можем шутить о том, насколько они душераздирающие и болезненные.Но эта боль имеет реальные последствия для команд и организаций. В наших интервью с сотнями руководителей, работающих в самых разных областях, от высоких технологий и розничной торговли до фармацевтики и консалтинга, многие говорили, что чувствовали себя перегруженными своими встречами — формальными или неформальными, традиционными или гибкими, личными или электронными. Один сказал: «Я не могу поднять голову над водой, чтобы дышать в течение недели». Другой рассказал, что проткнул ногу карандашом, чтобы не закричать во время особенно мучительного собрания персонала. Такие жалобы подтверждаются исследованиями, показывающими, что за последние 50 лет продолжительность и частота совещаний увеличились до такой степени, что руководители тратят на них в среднем почти 23 часа в неделю по сравнению с менее чем 10 часами в 1960-х годах. И это даже не включает все импровизированные встречи, которые не попадают в расписание.

    Об этой проблеме написано много, но предлагаемые решения обычно дискретны: сформулируйте четкую повестку дня, проводите встречу стоя, делегируйте кого-то вместо вас и т. д.В наших исследованиях и консультациях мы заметили, что настоящее улучшение требует системных изменений, потому что собрания влияют на то, как люди сотрудничают и как они выполняют свою работу.

    Дополнительное чтение

    Тем не менее изменение такой области редко рассматривается. Когда мы исследовали, почему люди терпят нагрузку, которую встречи оказывают на их время и рассудок, мы обнаружили нечто удивительное: те, кто ненавидит встречи и боится их больше всего, также защищают их как «неизбежное зло» — иногда с большой страстью. Рассмотрим этот отрывок из корпоративного блога топ-менеджера фармацевтической отрасли:

    .

    Я считаю, что обилие совещаний в нашей компании — это культурный налог, который мы платим за инклюзивную учебную среду, которую мы хотим создать… и я согласен с этим. Если альтернативой большему количеству совещаний является более авторитарное принятие решений, меньший вклад со всех уровней в организации и меньше возможностей для обеспечения согласования и общения путем личного взаимодействия, тогда давайте мне больше встреч в любое время!

    Безусловно, собрания необходимы для совместной работы, творчества и инноваций.Они часто укрепляют отношения и обеспечивают надлежащий обмен информацией. Они приносят реальную пользу. Но зачем кому-то возражать в защиту чрезмерных собраний, особенно если их мало кто любит?

    Потому что руководители хотят быть хорошими солдатами. Когда они жертвуют своим временем и благополучием ради встреч, они предполагают, что делают то, что лучше для бизнеса, и не видят затрат для организации. Они упускают из виду коллективную нагрузку на производительность, сосредоточенность и вовлеченность.

    Во-первых, время — это игра с нулевой суммой. Каждая минута, потраченная на бесполезное совещание, отнимает время для индивидуальной работы, которая так же важна для творчества и эффективности. Во-вторых, расписание, насыщенное совещаниями, прерывает «глубокую работу» — термин, который профессор компьютерных наук из Джорджтауна Кэл Ньюпорт использует для описания способности сосредоточиться, не отвлекаясь, на задаче, требующей когнитивных усилий. (В недавнем исследовании менеджеры всех направлений в США и Китае сказали нам, что это случается «слишком часто!») Как следствие, люди склонны приходить на работу рано, задерживаться допоздна или использовать выходные в качестве тихого времени, чтобы сконцентрироваться.

    Еще одна проблема заключается в высокой цене, которую компании платят за плохо организованные встречи. Например, Симона Кауфельд из Технического университета Брауншвейга и Нале Леманн-Вилленброк из Университета Амстердама в ходе исследования 20 организаций из автомобильной, металлургической, электротехнической, химической и упаковочной промышленности обнаружили, что неблагополучное поведение на собраниях (в том числе отклонение от темы, жалобы и критика) были связаны с более низкими уровнями доли рынка, инноваций и стабильности занятости.

    Счастье на работе тоже страдает. Исследование, проведенное Стивеном Рогельбергом из Университета Северной Каролины и его коллегами, показало, что то, как работники относятся к эффективности совещаний, коррелирует с их общей удовлетворенностью или неудовлетворенностью своей работой, даже после учета личностных качеств и факторов окружающей среды, таких как план работы, контроль и оплата. Вместо того, чтобы улучшать общение и сотрудничество, как предполагалось, плохие встречи подрывают эти вещи. Рассмотрим руководителя, который проткнул ногу карандашом.Улучшило ли это собрание сотрудников командную работу или помешало ей? Несколько положительных впечатлений в неделю не могут компенсировать множество мучительных и расточительных переживаний.

    Мы опросили 182 топ-менеджера в различных отраслях: 65% заявили, что совещания мешают им выполнять свою работу. 71% заявили, что встречи непродуктивны и неэффективны. 64% заявили, что встречи происходят за счет глубоких размышлений. 62% заявили, что встречи упускают возможность сблизить команду.

    Хорошей новостью является то, что мы обнаружили, что изменить способ проведения совещаний вашей командой и вашей организацией возможно.В этой статье мы описываем для этого пятиэтапный процесс, а также диагностическую работу, которую вам необходимо выполнить заранее. Часто результаты могут быть впечатляющими и выходить далеко за пределы конференц-зала. Например, в консалтинговой компании по финансовым и нормативным вопросам, которую мы изучали, через три месяца после того, как менеджеры начали переосмысливать подход фирмы к собраниям, опрос показал, что сотрудники почувствовали значительные улучшения в командном сотрудничестве (увеличение на 42%), психологическую безопасность, чтобы говорить и выражать мнения (увеличение на 32%) и производительность команды (увеличение на 28%).Улучшились и другие аспекты организационной жизни, а уровень удовлетворенности респондентов балансом между работой и личной жизнью вырос с 62% до 92%.

    Мы видели, какую пользу могут извлечь организации, если они сосредоточат свою энергию на преобразовании совещаний, а не просто будут терпеть их. Вот как определить и решить проблемы на собрании, с которыми может столкнуться ваша группа.

    Насколько уязвима ваша группа?

    Проблемы возникают, когда собрания планируются и проводятся без учета их влияния на групповое и индивидуальное рабочее время.Часто группы по умолчанию жертвуют коллективными или индивидуальными потребностями — или и тем, и другим. Эффективное уравновешивание этих потребностей идеально, но немногие организации делают это. В недавнем опросе, который мы провели с участием почти 200 руководителей высшего звена из различных отраслей, только 17% сообщили, что их встречи в целом являются продуктивным использованием группового и индивидуального времени. Другие респонденты сказали, что их встречи попадают в одну из следующих категорий:

    Пустая трата группового времени.

    Некоторые организации проводят относительно мало собраний, но плохо их проводят. В результате у людей остается достаточно времени для индивидуальных задач и глубоких размышлений, но групповая продуктивность и совместная работа снижаются, потому что каждое собрание неэффективно. Около 16% руководителей в нашей выборке сказали, что это верно для их работы.

    Команда одной из компаний международной электронной коммерции, которую мы изучали, проводила всего одну или две встречи в неделю, но по ряду причин они все равно казались пустой тратой группового времени. Во-первых, часы и места часто менялись в последний момент, поэтому многие люди приходили неподготовленными или не приходили вовсе.Во-вторых, повестка дня часто была расплывчатой ​​или избыточной с побочными разговорами, которые уже происходили, поэтому встречи казались штамповкой решений, принятых в другом месте. В-третьих, когда поднимались новые проблемы, дальнейшие шаги обычно оставались неясными, что приводило к большему количеству разговоров на боковой панели за пределами комнаты. Один разработчик программного обеспечения сказал нам, что он продолжал появляться на встречах, хотя редко получал от них какую-либо пользу, потому что его присутствие ожидалось его менеджером и всеми остальными. В качестве обходного пути он тайно выполнял свои собственные задачи во время встречи.Хотя это может показаться безобидным способом поддержания индивидуальной продуктивности в краткосрочной перспективе, в долгосрочной перспективе это приводит к ухудшению групповой производительности и духа товарищества. Когда люди не участвуют в обсуждении и не обращают внимания на то, что говорят, команда не может воспользоваться всеми преимуществами созыва, и собрание тратит впустую время каждого.

    Пустая трата времени.

    Иногда встречи бывают относительно высокого качества и, следовательно, технически являются хорошим использованием группового времени, но личное время рассеивается, потому что огромное количество встреч вытесняет индивидуальную работу, а плохое планирование нарушает критическое глубокое мышление.В нашем опросе руководителей 13% сказали, что их организации борются именно с этой проблемой.

    Вот пример того, как это работает: у одной проверенной нами частной инвестиционной компании был строгий протокол для проведения эффективных совещаний. Для каждой сессии предварительная работа была разослана с надлежащим уведомлением, были установлены четкие цели, а время встречи регулировалось в соответствии с повесткой дня. Следовательно, групповые обновления и решения обрабатывались эффективно. Однако по мере роста фирмы в еженедельный календарь добавлялось все больше и больше встреч.Несмотря на то, что они были хорошо организованы, сам их объем прерывал рабочий процесс и отнимал время, которое инвестиционный персонал мог посвятить критическим индивидуальным задачам, таким как поиск новых возможностей и углубление отношений с менеджерами в компаниях, которыми фирма владела или стремилась владеть. Как показывает опыт этой фирмы, чрезмерное количество совещаний вынуждает людей идти на компромисс в отношении того, как и когда выполнять свою работу в одиночку. Иногда задачи отбрасываются или обсчитываются. Но чаще люди крадут свое личное время, чтобы выполнить эту работу, жертва, которая, как показали исследования и практика, может привести к выгоранию и текучести кадров — высокой цене как для сотрудников, так и для организаций.

    Пожиратели индивидуального и группового времени.

    Многие организации, с которыми мы работали, страдают от тройного удара совещаний, которые (1) слишком часты, (2) несвоевременны и (3) плохо организованы, что приводит к потерям производительности, сотрудничества и благополучия как для групп, так и для лица. Это наихудший сценарий — и, к сожалению, наиболее распространенный. Большинство респондентов нашего опроса — 54% — отнесли свои собрания к этой категории.

    Один менеджер фармацевтической компании рассказала, что раз в две недели оказывалась на одно-двухчасовом совещании по «подготовке к рынку», потому что организатор действительно хотел, чтобы она присутствовала, утверждая, что каждый вклад был чрезвычайно ценен.Тем не менее, группа также обычно рассылала наборы слайдов команде для ознакомления заранее, а затем просто просматривала эти наборы во время собраний. Как этот менеджер спросила себя и свою команду: «Зачем вам нужно приглашать по одному человеку из каждой подгруппы из каждого отдела в комнату только для того, чтобы просмотреть каждый слайд в отдельности, когда вы уже отправили нам всю колоду?» Члены ее команды выразили сочувствие, сообщив, что каждый из них посещал десятки таких же расточительных собраний, из-за которых у них практически не оставалось времени на «настоящую работу» в течение дня. В подобных ситуациях групповое время тратится впустую, а индивидуальное стирается.

    Нахождение правильного баланса

    К сожалению, люди не могут решить эти проблемы самостоятельно. Только подумайте, сколько раз вы пытались сократить количество совещаний в своем календаре — возможно, без особого успеха. Поскольку так много людей участвуют в планировании и проведении собраний, на которые мы ходим, требуются коллективные усилия, чтобы их исправить.

    Однако при структурированном подходе к анализу и изменению шаблонов совещаний в вашей команде или подразделении вы можете добиться значительных улучшений.Мы видели, как группы избегали ловушки собраний, работая вместе над выполнением пяти основных шагов:

    .

    1. Собрать данные от каждого человека.

    Чтобы получить более четкое представление о том, как встречи влияют на вашу группу, используйте опросы или интервью для сбора данных и впечатлений от каждого человека. Это поможет вам оценить весь масштаб проблемы: вы узнаете, сколько обиды кипит под поверхностью и сколько работы не выполняется в течение дня.

    2. Вместе интерпретируйте данные.

    Затем очень важно собраться вместе как команда или подразделение, чтобы переварить все отзывы и проанализировать, что работает, а что нет. Это должно быть открытое, непредвзятое обсуждение результатов опроса или интервью. Нейтральные фасилитаторы могут помочь поддерживать конструктивный разговор. Однако делегирование интерпретации данных стороннему консультанту или даже части команды может подорвать успех. Вам потребуются вклад и анализ от всех членов команды, чтобы обеспечить широкое понимание и поддержку, необходимые для оставшихся шагов.

    Например, в консалтинговой компании по финансам и регулированию, которую мы изучали, предварительные интервью показали, что встречи так сильно сокращают календари, что для глубокомысленной работы остается очень мало двух- или трехчасовых блоков. Без достаточного количества времени, чтобы сосредоточиться, консультанты чувствовали, что их творческий потенциал и продуктивность истощаются. Эти разоблачения послужили тревожным звонком для менеджеров, которые планировали встречи, не полностью осознавая их влияние.

    3. Договоритесь о коллективной, лично значимой цели.

    Мы обнаружили, что личная выгода от инициативы группы является отличным мотиватором. Например, вы можете выделить определенное количество времени в неделю, чтобы люди могли сосредоточиться на самостоятельной работе — будь то в офисе или дома. Предоставление им такой гибкости и свободы может обеспечить необходимое облегчение в их графиках, а также стимул к тому, чтобы договоренность работала. Объявление «свободных от собраний» периодов также вынуждает всю группу пересматривать встречи, которые обычно назначались на это время, и спрашивать, кому действительно нужно их посетить.В результате мы обнаруживаем, что в целом команды проводят меньше совещаний, и на каждое из них приходит меньше людей. Дополнительное «белое пространство» в календаре каждого повышает индивидуальную продуктивность и сокращает вторжение в личное время.

    Вот как этот подход работал в консалтинговой компании, которую мы исследовали: участники базировались в Соединенных Штатах и ​​Индии, поэтому собрания по передаче дел проводились каждый день — рано утром для одних и поздно вечером для других, чтобы уложиться в 12,5-часовой рабочий день. Разница во времени.Долгие дни вызывали значительный стресс и усталость с обеих сторон: требовались ранние утренние звонки, пропускались семейные обеды, рабочий день длился более 12 часов. Как только команда собрала данные опроса своих членов и осознала масштабы проблемы, она изменила свой подход: каждому человеку был предоставлен один рабочий день в неделю, когда он или она не должны были участвовать в звонке о передаче.

    Чтобы обеспечить надлежащий обмен информацией, члены команды должны были найти способы прикрывать друг друга и держать всех в курсе.Изучение того, как это сделать, дало людям необходимый перерыв, но также привело к большему обмену знаниями и универсальности в группе. Кроме того, люди стали лучше понимать работу своих коллег, что привело к более интегрированным предложениям для клиентов.

    4. Ставьте вехи и следите за прогрессом.

    Как и в случае любых изменений, важно, чтобы конкретный и измеримый прогресс оценивался и обсуждался на этом пути. Небольшие ощутимые победы дают людям повод для радости, а небольшие поражения дают возможности для обучения и исправления.Рассмотрим следующий пример: в глобальной компании электронной коммерции команда из 30 сотрудников из США и Китая рассказала нам, что их еженедельные общие собрания были болевой точкой. Участники часто сидели со своими телефонами или ноутбуками. Поскольку люди постоянно отвлекались, те, кто говорил, должны были часто повторяться, что делало потраченное время не только более продолжительным, но и гораздо менее эффективным. Чтобы помочь решить эти проблемы, команда поставила перед собой простую и достижимую цель: не допускать использования посторонних технологий на собраниях.

    Поначалу несколько инженеров по вокалу и даже руководитель группы сопротивлялись, считая, что они должны иметь право пользоваться своими устройствами, особенно когда встречи становились скучными или затрагивали темы, не входящие в их компетенцию. Какое-то время после запуска инициативы были необходимы дружеские напоминания («Никаких технологий, чувак!»). Но со временем новая норма прижилась, и даже менеджер исправился, когда инстинктивно начал проверять свой телефон. Команда начала видеть преимущества этого эксперимента.Встречи стали более продуктивными, а люди более вовлеченными. Как сказал один инженер: «Это правило отсутствия технологий просто фантастика! Теперь, когда люди больше сосредоточены на совещании, оно стало более эффективным». Другой член команды начал приносить блокнот, чтобы записывать мысли, а не играть в игры на своем телефоне. Эта маленькая победа открыла дверь для установления других новых норм, таких как более тщательная заблаговременная подготовка материалов, максимально короткие встречи и, в конечном счете, изменение ритма встреч, чтобы лучше соответствовать графикам членов команды.

    5. Регулярно подводите итоги в группе.

    Наконец, мы обнаружили, что очень важно регулярно и открыто анализировать, как люди относятся к встречам, которые они посещают, и к своему рабочему процессу в целом. Разочарование, обида и даже безнадежность — это сигналы того, что люди возвращаются к плохим привычкам. Более того, изменение протоколов и моделей поведения требует времени, а поддержание импульса требует постоянного внимания и контакта.

    В фармацевтической компании, с которой мы работали, глобальный медицинский отдел организовал две регулярные «пульсовые проверки» для контроля за ходом эксперимента, который он проводил в дни, свободные от совещаний: одну проверку внутри подгруппы и одну проверку в подразделении.В начале каждой проверки пульса участники отвечали на четыре вопроса: Как вы себя чувствуете? Насколько ценны способы, которыми вы тратите свое время? Насколько хорошо вы работаете в команде? Это устойчиво?

    Ответы на эти вопросы вызвали предметные дискуссии, насыщенные эмоциональным, стратегическим и тактическим содержанием. Ранние разговоры были сосредоточены конкретно на проблеме совещаний, но со временем они все чаще касались того, как члены команды подходят к своей работе и друг к другу.Один менеджер сказал: «Я впечатлен тем, как эти встречи позволили людям открыться, особенно когда [менеджер] слушает… Проверка пульса действительно полезна — она дает мне хорошую дозу реальности… и они выявили проблемы, которые привели к в большем перекрестном охвате, развитии людей и командной работе. Звучит безумно, что этот маленький эксперимент может привести к таким результатам, но он имеет глубокие последствия, выходящие далеко за рамки первоначальной цели».

    Мы предлагаем краткие еженедельные проверки в течение нескольких месяцев, пока не будут внедрены новые нормы, процессы и отношения.После этого каждую вторую неделю следует это делать. Независимо от частоты проверок пульса, у людей должны быть регулярные, структурированные форумы, на которых они могут выражать свое разочарование и выявлять проблемы, а также улучшать совместную работу команды.

    Для всех этих шагов поддержка руководства имеет решающее значение, но она не обязательно должна исходить от высшего руководства. Мы обнаружили, что группа может изменить свой подход к собраниям, если руководитель группы имеет право побуждать людей поднимать вопросы, идти на риск, совершать ошибки и открывать новые способы совместной работы.Это может произойти, даже если группа тесно связана с другими группами в организации. Например, отказ глобального отдела по медицинским вопросам посещать встречи между отделами в свободные от собраний дни был встречен сначала с испугом, затем с любопытством и, в конечном счете, с изменениями во всей организации, поскольку нормы были разрушены и были смоделированы новые способы работы.

    Канал для перемен

    Как мы убедились во многих компаниях в различных отраслях, изменение такой простой вещи, как встречи, может иметь далеко идущие последствия.Один менеджер сказал: «Мы стали общаться более открыто и честно, что позволило нам лучше помогать друг другу… Мы помогали друг другу расставлять приоритеты, мы помогали друг другу находить доступ к другим ресурсам, а иногда мы перераспределяли задачи или просто помогали друг другу выполнять работа.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *